气溶胶递送 结核分枝杆菌 用于小鼠模型中肺部感染的研究

从一株结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）的冻存菌种开始，该病原菌可引起肺结核。

解冻菌液管，轻轻混匀悬浮液以分散细菌团块，确保浓度均匀。

用无菌缓冲液稀释所需体积，以制备标准化的气溶胶接种物。

将小鼠置于网状固定装置中以限制其活动，并将其放入密封的气溶胶暴露室中。

将制备好的接种物装入注射器，然后注入连接到腔室的雾化装置中。

启动吸入系统，该系统利用压缩空气将悬浮液雾化成细小的、可吸入的液滴。

这些含有可存活的结核分枝杆菌（M. tuberculosis）的液滴会扩散到腔室空气中。

清醒的小鼠吸入气溶胶，使有活性的细菌能够深入肺部并引发感染。

小鼠肺结核模型现已准备就绪，可供进一步研究。

首先将已知CFU滴度的Mycobacterium tuberculosis菌种解冻并升温。细胞融化后，使用带有27号针头的1毫升注射器轻轻吹打菌悬液5次，以充分分散细菌团块，同时避免产生气溶胶。根据所需的感染剂量，将适量的分枝杆菌菌液转移至含有无菌PBS的50毫升离心管中，终体积为6毫升。随后，将实验动物 individually 置于分隔的金属网篮中。将网篮放入圆形气溶胶暴露舱内，并关闭舱盖。

将文丘里雾化器单元连接到三个不锈钢套管接头上。用一支装有18号钝针头的10毫升注射器吸取分枝杆菌悬液，并将注射器置于密闭转运盒中带至气溶胶室。然后取下雾化器的螺帽，小心地将分枝杆菌悬液注入装置中，注意避免产生气溶胶。

将注射器丢弃至含有 2% Buraton 的锐器容器中，然后密封雾化器。

启动吸入装置。

当循环结束后，确认结核分枝杆菌悬液已完全雾化。