建立小鼠慢性铜绿假单胞菌皮肤伤口感染模型

以一只已麻醉的小鼠开始实验，其背部有两个全层切除性皮肤伤口，表皮层和真皮层均已通过手术切除。

透明薄膜敷料覆盖伤口，以隔离创面并防止外部污染。

让小鼠恢复一段确定的时间。

在此期间，含有不同成分的血液进入伤口，激活血小板，触发由纤维蛋白、纤连蛋白和蛋白聚糖组成的临时基质的组装，并启动血凝块形成。

重新麻醉小鼠，并向每侧 flank 注射生理盐水以维持水合状态。

接下来，通过薄膜向每个伤口注入定量的发光型铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）菌株。

细菌在临时基质中定植，该基质可支持其附着与生长。

基质和敷膜共同为生物膜的形成提供了有利环境，从而导致局部慢性感染。

记录发光情况以监测细菌感染。

手术后24小时，再次称量重新麻醉的小鼠，并在两侧 flank 皮下注射250微升预热的无菌0.9%氯化钠溶液。

接着，将100微升发光的P. aeruginosa菌株悬液加入一支配有27号针头的500微升结核菌素安全帽注射器中，通过透明薄膜敷料向每个伤口注入40微升细菌悬液。

确保细菌悬液充分混匀，且透明敷料完好无损。使用针头穿刺透明敷料时，务必仅穿刺一次，并使针头斜面朝上。

然后将小鼠放回笼中，置于加热垫上并进行监测，在笼底的饲料颗粒之间夹入高热量营养补充膏。