小鼠细菌感染的生物发光成像

取一只已麻醉且皮肤切口感染了致病菌的小鼠。

该细菌经过基因工程改造，携带含有 luxABCDE 报告系统的质粒，从而能够自主产生生物发光。

将小鼠置于生物发光成像平台上的俯卧位。

在感染部位，该细菌的 luxA 和 luxB 基因编码荧光素酶 luxCDE 基因编码合成长链脂肪醛的酶，后者作为荧光素酶的底物。

在氧气存在下，荧光素酶催化其辅因子还原型黄素单核苷酸的氧化反应，后者再与长链脂肪醛反应，产生蓝绿色光。

这种生物发光表明感染部位存在代谢活跃的细菌。

使用成像系统对感染部位进行成像，并定量分析生物发光信号强度。

对于感染伤口的活体成像，将小鼠运送至成像仪器及从仪器移出时，应遵循生物安全二级防护规程，并将麻醉后的小鼠置于成像室内的俯卧位。

在成像软件中，根据实验需求适当设置曝光时间、像素合并（binning）、光圈值（f-stop）和视野范围。

接下来，在伤口部位创建一个感兴趣区域，并测量以每秒光子数为单位的平均检测通量。

为测量背景信号，在成像平台的任意区域创建一个感兴趣区域，并从信号中减去每秒光子数的背景值。