从蚊子中肠分离细菌

从一张载玻片开始，载玻片上含有在磷酸盐缓冲液（PBS）液滴中的麻醉成年蚊子。

在解剖显微镜下，去除蚊子的腿、翅膀和头部。

剪除腹部末端，以避免损伤消化道。

固定胸部和腹部末端，然后轻轻拉出消化道以将其取出。

提取的消化道包含中肠，中肠负责消化功能，并定植有多种影响蚊虫生理机能的肠道细菌。

在更高倍镜下，小心去除周围结构以分离中肠。

将分离的中肠转移至含有 PBS 的新离心管中。

匀浆中肠以将细菌释放到磷酸盐缓冲液（PBS）中。

将稀释后的匀浆液涂布于营养琼脂平板上。

孵育培养板，使细菌菌落生长，以代表蚊子中肠的微生物群落。

在含有 PBS 液滴的无菌载玻片上分别解剖蚊子。使用镊子小心去除蚊子的足、翅膀和头部。

用镊子夹住蚊子的胸部和腹部最后一节，拉开以分离消化道。

使用镊子从消化道中移除嗉囊和马氏管。嗉囊位于中肠前端，在摄入糖水后会膨胀。马氏管是一组位于中肠与后肠交界处的细长排泄管。

将解剖出的中肠放入含有200 µL无菌PBS缓冲液的EP管中，在超净工作台内用无菌研磨杵充分研磨。将匀浆液进行连续10倍梯度稀释，取每种稀释液50 µL接种至LB琼脂平板，然后涂布平板。

将培养皿在37摄氏度下孵育一至两天，直至可见单菌落。