0 次观看 • 3:45 分钟 • February 2nd, 2026
从年龄相匹配的新生小鼠幼崽开始。
轻轻提起每只幼崽颈部后方的皮肤，对其中一只皮下注射低浓度的致病菌悬液，另一只则注射高浓度的致病菌悬液。
这些细菌表达一种可产生荧光素酶及其底物的生物发光操纵子，从而实现自主发光。
一层保护性多糖荚膜包裹着细菌，掩盖其表面抗原，阻止幼崽免疫细胞的识别。
将幼崽送回亲生母鼠处进行产后护理。
注射部位的细菌增殖会引发炎症反应和血管通透性增加，从而使细菌进入血液并发生全身性播散。
将麻醉后的幼崽置于生物发光成像系统下。
荧光素酶氧化底物产生可见光，从而实现对幼鼠体内细菌的可视化观察。
通过随时间捕获图像，比较接种高浓度和低浓度细菌的幼鼠中细菌的生长和扩散情况。
首先在生物安全二级柜内将年龄相匹配的幼崽分配至高剂量或低剂量窝仔组。在出生后第3天或第4天，接种前记录所有幼崽的体重。
使用 PBS 或高剂量、低剂量胰岛素注射器 E.coli 在生物安全柜中进行发光菌接种，并将装有菌液的注射器置于冰上。
将待注射的新生小鼠置于生物安全柜内的清洁表面上，提起其颈部后方的皮肤，如同抓取幼鼠背部皮肤一样。将针头斜面向上插入皮肤下方，在皮肤与肌肉之间形成的空隙处进针。当感觉到针头位于皮肤下时，注入50 µL接种物，同时松开捏起的皮肤部分，以防止液体回流。然后缓慢而小心地拔出针头。
当所有仔鼠均以相同方式注射后，将其放回母鼠身边。注射后立即以及在随后的适当实验时间点，将带有大肠杆菌（E.coli）lux感染的新生小鼠及母鼠的笼子放入生物安全二级水平的层流罩中，并启动微型CT计算机中的软件。在系统初始化后，待载物台温度稳定在37摄氏度、CCD温度稳定在负90摄氏度时，将最多四只麻醉后的仔鼠以俯卧位放置于成像室内的成像盒中。
关闭成像室门，选择生物发光成像模式。选择“开放滤光片”，然后下一步，将激发滤光片设置为“阻断”，发射滤光片设置为“开放”。选择500、520、560、580、600和620纳米。
然后，在将幼崽放回母鼠笼中之前进行成像，并在麻醉恢复期间持续监测。