为宿主-病原体相互作用研究制备溶血性Staphylococcus aureus培养物

从含有红细胞的加血选择性营养琼脂平板开始。

将革兰氏阳性致病菌Staphylococcus aureus （S. aureus）划线接种于琼脂平板上，并进行培养。

孵育期间，细菌利用营养物质生长并形成菌落。

S. aureus 分泌溶血素，这是一种成孔毒素，可裂解琼脂中的红细胞，在菌落周围形成清晰透明的区域，表明发生溶血。

选择一个溶血菌落，接种到营养肉汤中，并在旋转条件下培养以促进细菌生长。

使用分光光度计，通过测定光密度（OD）来确定细菌浓度。

根据 OD 读数，取适量菌液转移至新鲜营养肉汤中以稀释细胞，并在摇床水浴中孵育。

定期测量 OD 值。

OD 接近 0.8 表明细菌已进入生理状态均一的指数生长期。

这种溶血性 S. aureus 已准备好用于宿主-病原体相互作用研究。

从冷冻甘油菌种中将感兴趣的S.aureus菌株划线接种于血琼脂平板，37摄氏度培养16至24小时，通过观察其溶解红细胞的能力以及是否形成清晰透明的溶血环，以确认其溶血表型。

用无菌玻璃试管，将每种菌株的单菌落分别接种于4毫升胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）中，在37摄氏度下以约70度倾斜角、70转/分钟的转速于试管旋转仪中培养16至24小时。次日早晨，使用分光光度计测定各培养物在600纳米处的光密度（OD₆₀₀），然后将细胞用无菌TSB稀释至OD₆₀₀为0.05，转移至125毫升DeLong摇瓶中，总体积为25毫升，即摇瓶体积与培养液体积之比为5:1。将培养物置于37摄氏度水浴中，以280转/分钟振荡培养。