体外研究自噬介导的胞内细菌清除

取猪肾细胞培养物，其中一组培养物预先用提高溶酶体pH值的抑制剂处理，以损害自噬-溶酶体降解功能。

加入病原菌并离心，以增强宿主与病原菌的接触。

孵育以促进细菌侵入并内化至内吞囊泡中。

内化的细菌消耗宿主营养物质进行复制，从而引发代谢应激。

这种应激会激活自噬，其中自噬膜在囊泡周围扩展，形成自噬体。

在未经处理的细胞中，自噬体靶向细菌并将其运送至溶酶体进行降解。

在抑制剂处理的细胞中，自噬清除功能受损，导致细菌载量升高。

感染后，洗涤细胞并加入抗生素以清除细胞外细菌。

加入一种酶以消化细胞外基质并使细胞脱落。

通过机械裂解细胞以释放胞内细菌。

接种裂解液以促进细菌生长。

未处理细胞中菌落数量减少，证实了自噬-溶酶体降解途径在清除胞内细菌中的作用。