使用C. elegans液体毒性检测法评估细菌毒力

取一个含非致病性细菌悬液的多孔板作为对照，以及多种致病性细菌菌株，以评估其相对毒力。

将细菌悬浮于营养受限的培养基中，以防止过度生长，并模拟利于感染的环境。

将L4期的C. elegans线虫加入每个孔中，并在持续振荡条件下孵育培养板，以增强细菌与线虫之间的接触。

这些蠕虫以细菌为食，细菌进入其肠道并在其中定植。

致病菌释放毒素，损害肠道组织，导致线虫出现全身性中毒并最终死亡。

孵育后，计数每个孔中的活体线虫，并绘制图表以评估其存活率。

线虫存活率的差异反映了每种细菌菌株的相对毒力。

按照前述方法培养Aeromonas菌株并测定其吸光度后，将细菌培养液在3,500g条件下离心15分钟。用S培养基调整细菌培养液浓度，然后将195微升含细菌的S培养基加入96孔板的八个孔中。用M9培养基将线虫从ENGM平板上冲洗下来，随后将线虫悬液浓度调整为每微升5条线虫。

向96孔板的每个孔中加入5 µL线虫溶液。将板子置于摇床上孵育，并在24、48和72小时时计数活线虫的数量。