肌肉坏死检测 秀丽隐杆线虫 由致病性诱导 气单胞菌属 菌株

从一块含有致病菌Aeromonas菌苔的营养丰富的线虫生长培养基平板开始。

将表达肌肉特异性GFP的L4期C. elegans线虫转移至细菌草坪上并进行培养。

线虫在摄取营养物质的同时会摄入细菌，这使得细菌能够到达并定植于肠道内。

利用一种特殊的分泌系统，Aeromonas 将毒力因子递送至线虫的肠细胞内。

这些毒力因子扩散至体壁，破坏肌肉，导致结构损伤和坏死。

每天将线虫转移至含有细菌菌苔的新培养皿，以维持持续的病原体暴露。

将蠕虫置于添加了麻醉剂的琼脂糖凝胶上以进行麻醉，然后加盖盖玻片。

使用 GFP 滤光片，定期采集荧光图像。

GFP 信号的逐渐减弱表明了秀丽隐杆线虫（C. elegans）肌肉结构的破坏，代表了在宿主-病原体相互作用过程中由气单胞菌（Aeromonas）引起的肌肉坏死。

在培养气单胞菌（Aeromonas）菌株并根据文本方案调整吸光度后，将菌液点种并涂布于NGM平板上。

此后，将50条L4期线虫转移至每块NGM平板上。每隔24小时将线虫转移至新的NGM平板。随机选取10条线虫，将其转移至载玻片上含有M9培养基的2%琼脂糖凝胶中。

最后将盖玻片置于凝胶上，使用配备相机的荧光显微镜，结合绿色荧光蛋白滤光片拍摄肌肉图像。