由菌毛纤维介导的细菌水凝胶图案的稳定化

取两个含有3D打印海藻酸盐基质的培养皿，每个基质中分别包埋有对照或待测细菌菌株。

两种菌株均组成型表达一种荧光蛋白以用于可视化。测试菌株还含有一个可诱导的基因，用于产生称为纤维素纤维的蛋白质性质的胞外纤维。

将模式印在添加了钙和鼠李糖的固体培养基上。

孵育以使钙离子交联海藻酸盐，形成水凝胶。

在测试菌株中，鼠李糖可诱导产生卷曲纤维亚基，这些亚基可在细胞表面自组装成纤维。

使用荧光扫描仪对图案进行成像。

使用钙螯合溶液处理并振荡孵育，以螯合钙离子，从而破坏海藻酸盐的交联结构并溶解水凝胶。

弃去溶液，重新对图案成像。

该处理导致对照组的模式解体，而由于卷曲纤维形成的稳定网络，实验组的模式保持完整。

将打印的样品在室温下孵育三至六天，以促进生物膜组分（如 Curlin 纤维）的生成。

然后，将培养皿置于荧光扫描仪上并成像。

为了溶解海藻酸盐基质，向打印的基底中加入 20 毫升 pH 7 的 0.5 摩尔柠檬酸钠溶液，在室温下孵育平板，同时以 30 rpm 的速度振荡两小时。

然后，弃去液体，再次对平板进行成像，以与柠檬酸处理前后的平板图像进行比较。