0 次观看 • 2:46 分钟 • February 26th, 2026
从人肠道微生物群在体外发酵胞外多糖过程中产生的上清液开始。该上清液含有去质子化的短链脂肪酸（SCFAs）及其他代谢产物。
加入偏磷酸以降低上清液的pH值，并涡旋充分混匀。此步骤可将短链脂肪酸（SCFAs）转化为质子化形式，适用于气相色谱分析。
离心以分离沉淀物，并收集含有短链脂肪酸（SCFAs）和其他代谢物的上清液。
过滤上清液以去除残留碎片，避免对色谱过程产生干扰。
在高效气相色谱系统中，将上清液注入加热进样口使其汽化。然后，将蒸汽与惰性气体混合，并通过极性固定相色谱柱进行分离。
短链脂肪酸（SCFAs）与色谱柱的固定相相互作用，并根据其挥发性进行分离，短链酸比长链酸更早被洗脱出来。
通过与内标品比较结果来确定不同短链脂肪酸（SCFAs）的浓度。这反映了在模拟肠道条件下微生物对胞外多糖的降解情况
为研究 EPS 对短链脂肪酸（SCFA）生成的影响，取 1 毫升发酵上清液加入 2 毫升离心管中，每份样品加入 0.2 毫升 25%（重量/体积）的偏磷酸溶液。涡旋振荡以充分混匀溶液。将混合物在 13,000 × g 条件下离心 g 20分钟。
同时，在试管中配制120毫摩尔的乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸溶液。然后将每种配制好的酸各取1毫升加入含有1.2毫升25%（重量/体积）偏磷酸的试管中，并将混合液转移至气相色谱仪的样品瓶中，作为标准混合液。
从离心机中取出试管，将上清液转移至新的离心管中。使用配备0.22 µm滤器的注射器将上清液过滤至新管中，用于气相色谱分析。