B族链球菌定量检测 链球菌 通过拭子取样和显色培养对小鼠阴道腔进行接种

取一只经阴道定植B族链球菌的雌性小鼠 链球菌 或B族链球菌（GBS），一种阴道道的机会性细菌病原体。

固定小鼠，并将用缓冲液润湿的拭子插入阴道腔内。

轻轻旋转拭子，同时对阴道壁施加轻微压力，以去除附着在表面的细菌。

将拭子浸入缓冲液中并振荡，以悬浮细菌。

用缓冲液对该悬液进行系列稀释，并将其接种于含有与显色剂相连底物的显色鉴别琼脂平板上。

孵育以促进细菌生长。

孵育期间，GBS 表达一种特异性酶，可水解显色底物。

释放的发色原发生自发氧化和二聚化，形成粉红色或紫红色化合物。

这会导致出现粉红色或淡紫色的GBS菌落，在视觉上与其他细菌菌落明显不同。

计数菌落以定量分析GBS负荷，并评估其在小鼠模型中的持续存在情况。

在进行拭子采样前，先将棉签用 PBS 预先润湿，并如刚才所示固定住其中一只小鼠。

将拭子插入阴道腔内10毫米，轻轻顺时针旋转四次，再逆时针旋转四次，同时对阴道壁施加轻微压力。

将拭子放入含有100微升PBS的1.5毫升微量离心管中，涡旋震荡管子和拭子约15秒，以使细菌从棉纤维中释放出来。随后，在PBS中对每个样本进行系列稀释，并取20微升1:10至1:10,000的稀释液，接种于按制造商说明制备的鉴别培养基琼脂平板上，于37摄氏度培养24小时。GBS菌落将呈现亮粉色或紫红色。