利用聚合酶链式反应检测二元培养中的糖类细菌

0 次观看2:06 分钟 • February 26th, 2026

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从被糖类细菌感染的 放线菌 培养开始。

糖化菌是一种超小型寄生细菌,与其宿主形成二元培养。

将感染培养物的分度加入含有电泳追踪染料和糖类特异性引物的PCR管中。

将管子放入设定PCR条件的热循环器中。

在初始变性过程中,热解糖类细菌,释放基因组DNA。 放线菌 因细胞壁坚硬而保持完整,限制宿主DNA的释放。

热量随后使糖类菌DNA链变性,激活Taq聚合酶。

退火过程中,引物与糖类细菌基因组中的互补序列结合。

进一步来说,Taq聚合酶向引物中添加dNTP,合成新的DNA链。

将扩增后的PCR产物加载到预先染色过与DNA片段结合的琼脂糖凝胶上。

用电泳观察凝胶在紫外线下。

一个糖化细菌特异性的扩增子带确认了二元培养中的宿主-寄生虫相互作用。

将24微升PCR主混合液放入0.2毫升PCR管中。在1微升糖类细菌感染培养物时,将管子放入热循环器中。

按照文本中描述的设置PCR程序。将PCR产物装载并运行在1%的Agros凝胶上。约600碱基的带能确认糖菌的存在。

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最后更新:1 八月 2026