JoVE 实验百科全书
微生物学
0 次观看 • 2:18 分钟 • March 31st, 2026
从一个含有土壤细菌单菌落的培养平板开始。
挑取单菌落并接种至含有营养培养基的带挡板的培养瓶中。
在振荡条件下培养该培养物。
带挡板的烧瓶具有内部脊状结构,可在摇动过程中增加湍流,从而增强通气效果。
该过程可确保氧气均匀分布,并防止细胞聚集和沉降,从而实现营养物质的均匀分散。
细菌快速增殖,形成细胞具有均匀生理特征的浓密悬液。
定期在比色皿中收集样品。
使用分光光度计,使光线穿过样品。通过测量透射光的量来量化细菌生长,该值称为光密度(optical density)或 OD。
选择处于对数期至早期稳定期的细菌培养物,因为此阶段的细胞代谢活性较高,因此最易于被噬菌体高效感染。
将节杆菌菌落接种于LB琼脂平板上,于30摄氏度培养2至3天,从而培养节杆菌细胞。
使用无菌接种环挑取单菌落,并将其加入含有50毫升LB液体培养基的带挡板的培养瓶中。将培养瓶置于摇床培养箱中,在30摄氏度、225转/分钟的条件下振荡培养约24小时,以获得用于噬菌体感染实验的对数期或早期稳定期细胞。
密切监测细菌生长状态,防止细胞进入中后期稳定生长期。理想的OD600 用于噬菌体分离的值在0.5到0.7之间。