小鼠烧伤伤口感染Acinetobacter baumannii的生物发光成像

将麻醉后的小鼠腹部下方放置一个培养皿盖，以保持其背部水平。

小鼠背部有烧伤创口，且已感染革兰氏阴性细菌病原体 Acinetobacter baumannii。

这些细菌经过基因工程改造，携带一个生物发光操纵子。

将小鼠放入保持在最佳温度的生物发光成像室中，并开始成像。

在感染部位，生物发光操纵子中的luxA和luxB基因编码荧光素酶。而luxCDE基因则编码合成荧光素酶底物的酶。

荧光素酶催化底物氧化并产生可见光，使细菌发光。

生物发光信号表明伤口部位存在代谢活跃的细菌。

使用成像软件定量生物发光信号强度，以估算可存活细菌载量。

接种后立即开始活体成像软件，进行生物发光成像。在控制面板中，单击“初始化”，然后等待温度框颜色变为绿色，表明样本室载台温度已达到 37 °C。

将麻醉后的小鼠放置于样本室内的加热载物台上，使感染的烧伤部位正对摄像头下方。接着，在控制面板中，勾选“Luminescence”旁边的复选框。

然后选择“自动曝光”，以便活体成像软件根据生物发光强度自动优化成像的曝光时间。从“视野”下拉列表中选择“C”。选择扫描中程选项，以使软件确定焦距。

然后在叠加选项旁打勾。接着，点击“采集”以获取图像。随后，在“编辑图像标签”框中点击确定。将出现“图像窗口”和“工具面板”。设置自动ROI参数以实现自动选择。