0 次观看 • 2:15 分钟 • March 31st, 2026
在受控条件下培养玉米幼苗，作为寄主使用。
接下来，取Agrobacterium tumefaciens，一种植物致病菌。
经过基因改造的细菌携带一种T-DNA结构，该结构编码一个重组病毒基因组。该基因组包含一个插入的基因片段，旨在沉默目标玉米基因。
将细菌注射到胚芽鞘节上方，即植株最下方的节位处，直至悬浮液充满胚芽鞘，以确保将细菌递送至内部组织。
在注射部位，细菌将携带病毒基因组的T-DNA转移至玉米细胞中，随后T-DNA被转录为病毒RNA，并进入细胞质。
RNA进行复制并触发病毒蛋白的产生，形成新的病毒颗粒，这些颗粒系统性扩散以建立感染。
携带目的基因片段的病毒RNA可激活植物的RNA干扰机制，导致特定的玉米mRNA降解，从而沉默目标基因。
随着被感染植株的生长，靶基因调控的表型出现可见的变化，例如坏死病斑的形成，从而证实基因沉默成功。
使用4至7天大的玉米幼苗进行注射 农杆菌组装注射器和针头。将细菌悬液轻轻注入芽鞘节上方2-3毫米处，直至芽鞘充满或在叶鞘中可见，具体位置取决于植株的生长阶段。
对所有幼苗进行注射，并在注射每种载体时更换注射器和针头。通过观察叶片上因沉默对照基因、类病变模拟22或八氢番茄红素脱氢酶而产生的病斑，确认表型感染情况。