利用可活细胞计数评估致病细菌对番茄幼苗根部的定殖情况

0 views • 2:30 min • February 26th, 2026

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准备装有在无菌沙中种植的番茄幼苗的容器。

幼苗根部会接种产生纤维素的野生型或缺乏纤维素的植物致病菌突变株。

从一个容器中取出密封材料,倒置在无菌纸上,然后敲击以释放装有植物的沙筒。

将沙筒纵向劈开,露出沙根。

然后,将根浸入无菌缓冲液中摇晃,以脱落松散附着的细菌。

对另一个根重复这个过程。

把洗净的根转移到新的缓冲液中。用超声波释放紧粘细菌。

利用这些超声检测悬浮液制备序列稀释液,将其镀在琼脂上,并培养以让可存活的细菌形成菌落。

野生型菌株的活性菌株数量较纤维素缺乏突变株更高,凸显了纤维素纤维在促进细菌对根表面附着中的关键作用。

为了确定在沙子中生长的植物中可检测到的活性细菌数量,首先从容器顶部和底部移除密封材料。

将容器放在无菌纸上,轻轻敲打表面以松动沙子,然后轻轻将带植物的沙子从容器中抬起。

当沙子圆柱和植物在纸上自由时,将沙子从中间劈开,露出植物的根。如有需要,可以从容器边缘和根部附近取样。这有助于确定细菌的扩散、积累和生长情况。

将根部取下,将松散附着的沙子和细菌,方法是将根浸入定量的水或缓冲液中,轻轻摇晃。通过将细菌在合适的培养基(如Luria琼脂)上进行洗板,确定该悬浮液中细菌的存活细胞数。这代表与根部松散关联的细菌数量。最后,通过超声波去除紧密结合的细菌并确定其数量。

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Last updated: 18 July 2026