基于PCR的富集蝇类样本中食源性病原体检测

将含有针对目标食源性病原体的PCR预混试剂的聚合酶链式反应（PCR）管置于预冷的PCR管架上。

每片试剂包含针对特定目标的引物、DNA 聚合酶、dNTPs 以及用于 PCR 反应的荧光染料。

加入含有大量病原菌DNA的富集果蝇裂解液，以形成反应混合物。

使用光学封口帽密封管子，以防止蒸发。

将PCR管放入热循环仪中，并使用针对每种目标病原体的特异性程序分别进行PCR扩增。

在PCR过程中，DNA发生变性，引物与目标序列结合，扩增产生双链DNA，后者与染料结合并发出荧光。

重复循环可导致 DNA 指数级扩增和荧光信号增强。

该仪器通过实时追踪荧光，以检测样本中是否存在目标食源性病原体。

开始基于PCR的检测时，首先将PCR管架放在冷却块上进行预冷。然后，将含有目标食源性病原体PCR即用型试剂片的相应PCR管放入支架中。

使用脱盖工具小心取下PCR管的管盖并丢弃。确认每根PCR管内含有一个试剂片。随后，将50 µL裂解液转移至相应的PCR管中。

使用封盖工具将新的光学盖固定在 PCR 管上。反应体系构建完成后，将 PCR 管放入 PCR 仪检测系统中。然后按照制造商提供的操作说明运行程序并查看结果。