0 次观看 • 2:56 分钟 • February 26th, 2026
从一个含有已感染表达荧光蛋白的致病性大肠杆菌（E. coli）的多孔板开始。
加入麻醉后的斑马鱼幼鱼，并在 daylight 条件下共同孵育，以模拟其自然摄食环境。
孵育期间，幼虫恢复意识并捕食被感染的草履虫。
一旦被摄入，草履虫会被消化，从而将大肠杆菌（E. coli）释放到肠道中。
细菌定植从肠道前部向后部推进，模拟了食源性感染的过程。
接着，用添加了麻醉剂的培养基洗涤幼虫，以使其重新麻醉。
然后，将幼虫置于荧光成像板内的低熔点琼脂糖中。
使用体视显微镜对齐斑马鱼，并孵育以使琼脂糖凝固。
使用添加麻醉剂的营养丰富的培养基进行覆盖。
使用荧光显微镜观察幼虫体内荧光标记的E. coli分布情况，以评估细菌感染的进展
对于斑马鱼的食源性感染，将草履虫样品稀释至每毫升 E3 培养基含 2 × 10⁵ 个草履虫的浓度，并按每种实验条件，向 6 孔板的每个孔中加入 3 毫升草履虫培养物。
接下来，将10条麻醉后的斑马鱼转移至每个孔中，液体体积尽量最小，然后在昼夜循环培养箱中，于30摄氏度、日光条件下共培养2小时。
孵育结束后，在5个不同的孔中分别用3毫升新鲜E3培养基洗涤斑马鱼，每孔E3培养基中添加100毫克/升的三卡因，然后将每条斑马鱼包埋于3毫升1%低熔点琼脂糖中，置于黑色壁的6孔板中。
当所有鱼样本均包埋完毕后，将培养皿置于体视显微镜下，使用剪去尖端的加样枪头调整，确保每个视野中鱼的头部朝左、尾部朝右。
等待琼脂糖凝固5分钟，然后用含有三卡因的新鲜E3培养基覆盖包埋的斑马鱼，并在荧光显微镜下对斑马鱼进行成像，以评估细菌感染的进展情况。