利用微灌胃法建立斑马鱼幼鱼感染模型

将一条麻醉后的斑马鱼幼鱼放入琼脂糖模具的凹槽中，使其头部向上倾斜，以便在注射时接近肠道。

用低熔点琼脂糖覆盖，然后让琼脂糖凝固以固定幼虫。

取一支含有悬浮于示踪染料溶液中的致病菌的显微注射针。

在体视显微镜下，将针头倾斜一定角度，引导针头穿过琼脂糖进入幼虫口部。

将其推进食管进入肠道。

将细菌注入肠腔，并使用示踪染料确认递送效果。这种称为微量灌胃的非侵入性方法，可模拟自然感染途径。

拔出针头。切下琼脂糖并将幼虫转移至新鲜培养基中。

细菌在肠道内复制并释放毒素，损害肠上皮，促进细菌侵入并在深层组织中定植。

斑马鱼感染模型已准备就绪，可供分析。

在含有凹槽的 1.5% 琼脂糖平板上，将一滴 0.8% 低熔点琼脂糖置于斑马鱼幼体上，使其覆盖。

轻轻调整幼鱼，使其头部朝上呈45度角，尾部紧贴沟槽壁。轻柔操作针头穿过琼脂糖，进入斑马鱼幼鱼的口部，并通过食道。当针尖进入前肠膨大部后，按压注射踏板，注入0.5至1纳升的细菌培养液。

填充肠道管腔，避免液体从食管或泄殖腔溢出。轻轻将针头从斑马鱼口中抽出。灌胃后，使用柔软的微量移液吸头从琼脂糖中取出感染的斑马鱼幼鱼：先切割周围琼脂糖，再将幼鱼提起。