监测细菌定植 拟南芥 无土栽培系统中的根系

0 次观看2:32 分钟 • March 31st, 2026

从生长在无土系统中液体培养基表面漂浮的低密度网状支撑物上的Arabidopsis thaliana幼苗开始。

这些幼苗已预先接种了能够定植于根部并形成生物膜的细菌。

握住幼苗,用镊子轻轻夹住子叶下方的茎部。

然后,从网筛中取出幼苗,注意不要损伤根部,以保持已被定植的根系结构。

将幼苗转移至含有双蒸水的多孔板中。

用锡箔纸覆盖培养板,使用多探头超声波破碎仪对样品进行超声处理,以破坏生物膜并从根面脱离细菌。

超声处理后,用超声处理过的细菌悬液进行系列稀释。

将稀释后的样品接种到琼脂平板上,并加入玻璃珠以均匀涂布细菌。

去除珠子,孵育平板以使有活力的细菌形成菌落。

菌落形成证实了细菌在无土系统中成功定植于根部。

清洗后,用经火焰灭菌的镊子轻轻从网片叶片侧的叶下插入,夹住幼苗茎部,轻轻夹紧茎部并轻轻晃动幼苗,使其从网片中脱离,避免损伤根部。为去除植物根部的细菌,将每片网上的幼苗分别转移至含有1毫升双蒸水的24孔超声振荡板的各个孔中。

使用手稿中所述的多探头超声仪,对所有置于板中的样品同时进行超声处理。为定量细菌,将超声处理后的样品在细菌培养基中进行10倍系列稀释。使用无菌玻璃珠涂布,并在细菌最适生长温度下培养,直至可计数单个菌落。