建立共培养模型在气液界面研究宿主-病原体相互作用

从一个含有 transwell 膜插件的多孔板开始。

插入物的膜上侧含有一层汇合的支气管上皮细胞层。

插入物的下层在培养基中承载类似巨噬细胞的细胞，模拟人体气道上皮屏障。

将悬浮于缓冲液中的致病菌添加到上皮层上。

孵育以促进细菌附着于上皮细胞及其定植。

然后，从插入物中移除缓冲液，同时保留孔中的培养基，以形成气-液界面。

细菌分泌的毒力因子与上皮细胞紧密连接相互作用并破坏这些连接。

这会增加上皮层的通透性，并触发上皮细胞释放促炎性细胞因子。

这些细胞因子促进类似巨噬细胞向表皮层迁移，在此识别并吞噬细菌。

这建立了气液界面处的上皮细胞-巨噬细胞共培养模型，用以模拟呼吸道中病原体的暴露情况。

向可渗透支持膜的顶端加入 100 微升细菌悬液，在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳条件下孵育 1 小时，使细菌附着于细胞。随后，用移液器小心吸除顶端液体，以恢复气液界面（ALI）条件。