0 次观看 • 1:50 分钟 • July 1st, 2026
从一个含有 transwell 膜插件的多孔板开始。
插入物的膜上侧含有一层汇合的支气管上皮细胞层。
插入物的下层在培养基中承载类似巨噬细胞的细胞,模拟人体气道上皮屏障。
将悬浮于缓冲液中的致病菌添加到上皮层上。
孵育以促进细菌附着于上皮细胞及其定植。
然后,从插入物中移除缓冲液,同时保留孔中的培养基,以形成气-液界面。
细菌分泌的毒力因子与上皮细胞紧密连接相互作用并破坏这些连接。
这会增加上皮层的通透性,并触发上皮细胞释放促炎性细胞因子。
这些细胞因子促进类似巨噬细胞向表皮层迁移,在此识别并吞噬细菌。
这建立了气液界面处的上皮细胞-巨噬细胞共培养模型,用以模拟呼吸道中病原体的暴露情况。
向可渗透支持膜的顶端加入 100 微升细菌悬液,在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳条件下孵育 1 小时,使细菌附着于细胞。随后,用移液器小心吸除顶端液体,以恢复气液界面(ALI)条件。
本文介绍了一种在气液界面(ALI)条件下培养支气管上皮细胞与类巨噬细胞的三维共培养模型,用于研究宿主与病原体之间的相互作用,特别关注铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染。该模型模拟了人体气道上皮屏障,可通过观察上皮完整性、免疫细胞活化及病原体清除机制,实现对抗感染策略的临床前评估。
在气液界面建立三维共培养模型,可在生理相关的呼吸系统环境中对宿主与病原体相互作用进行可预测性评估。该系统通过模拟上皮屏障破坏及免疫细胞反应,为抗感染药物发现提供机制性风险降低支持。该方法可提高临床前抗感染候选药物评价及项目筛选的转化可信度。
这种共培养模型可融入抗感染药物研发从发现到临床前研究的连续过程,架起早期机制研究与临床前候选药物评价之间的桥梁。
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最后更新:29 八月 2026