评估T4噬菌体与E. coli在小鼠粪便样本中的共存情况

取一根含有小鼠粪便颗粒的试管，该小鼠肠道感染了大肠杆菌（E. coli）和T4噬菌体。

噬菌体与E. coli相互作用，将其遗传物质注入细菌内部，并在其中进行复制。

受感染的细菌裂解，释放出新的噬菌体，感染附近的 E. coli。

一些 E. coli 逃避噬菌体感染，使噬菌体和细菌能够共存并出现在粪便颗粒中。

为了评估它们的共存情况，向粪便颗粒中加入缓冲液，并涡旋混合物以使噬菌体和细菌释放到悬浮液中。

制备粪便悬液的系列稀释液。

将每个稀释液分别点样到营养琼脂平板上以定量大肠杆菌（E. coli），并点样到含有培养后大肠杆菌（E. coli）的琼脂平板上以定量噬菌体。

孵育平板。细菌会形成菌落，而噬菌体则裂解细菌形成噬菌斑。

细菌菌落和噬菌体噬斑的同时出现证实了它们在宿主内的共存。

首先，收集接种了T4噬菌体的Escherichia coli单菌定植小鼠的粪便颗粒，放入无菌的预先称重的微量离心管中。

记录离心管的最终重量，并通过减去离心管初始重量计算样品重量。向离心管中加入 1 毫升无菌 SM 缓冲液，并以最大速度涡旋震荡以充分混匀粪便颗粒。记录每个样品中加入的 SM 缓冲液体积，用于每克样品中菌落形成单位（CFU）或噬菌斑形成单位（PFU）的计算。

将每个样品各20微升在180微升SM缓冲液中进行连续八倍系列稀释。取每种稀释液5微升点样于含有E. coli的LB琼脂平板或仅含LB琼脂的平板上，以测定T4噬菌体和E. coli的浓度。待每点完全干燥后，将平板倒置，并在37摄氏度下过夜培养。

第二天，选择每个点有 3–30 个可计数噬斑的稀释度。计数并记录噬斑数量及所用稀释度。