登革病毒抗体在人原代巨噬细胞中对寨卡病毒的抗体依赖性增强作用

从含有登革病毒抗体的人血清的系列稀释液开始。
将解冻的寨卡病毒加入稀释后的血清中并进行孵育。
寨卡病毒与登革病毒的包膜蛋白具有相似的结构，这使得登革病毒抗体能够结合寨卡病毒的包膜蛋白并形成免疫复合物。
取一培养皿，内含表达Fcγ受体的人原代巨噬细胞。
移除培养基，并用缓冲液洗涤细胞。
随后加入免疫复合物并进行孵育。Fcγ受体可识别与抗体结合的病毒，并通过内吞作用将其内化，该过程称为抗体依赖性增强作用。
孵育结束后，进行洗涤以去除未结合的免疫复合物。
加入新鲜的富含营养的培养基，并继续孵育。
在细胞内，寨卡病毒复制其RNA并合成病毒蛋白，导致子代病毒在细胞质内组装。
经增强感染的巨噬细胞现已准备好用于后续分析。

首先，在无菌的平底96孔板中，每孔加入100微升细胞培养基，接种3×10⁴个细胞。所有细胞接种完毕后，将培养板置于37°C、5%二氧化碳的培养箱中孵育，并在无血清培养基中对解冻的人血清样本进行10倍系列稀释。

在将稀释后的血清加入病毒溶液和细胞之前，务必确保所有免疫前血清的稀释度及稀释倍数保持一致。接下来，将寨卡病毒毒株的储备液在37摄氏度水浴中解冻一至两分钟，然后迅速转移至冰上。向血清等分试样中加入0.1感染复数（MOI）当量体积的寨卡病毒，并将培养板置于细胞培养箱中孵育1小时，使登革病毒抗体与寨卡病毒颗粒形成复合物。

孵育结束后，每孔加入100微升PBS洗涤细胞，然后每孔加入50微升免疫复合物。经过两小时孵育后，吸去培养基，并用每孔100微升PBS洗涤两次，以彻底去除免疫复合物及未结合的病毒颗粒。随后，每孔加入100微升含10%胎牛血清的细胞培养基对细胞进行培养。

然后将细胞放回细胞培养箱中孵育48小时。