病毒生长与技术

来源： Tang, N., et al. 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建重组禽疱疹病毒载体. J. Vis. Exp.

来源：Cross, T., et al. 一种从土壤样本分离物中分离Arthrobacter噬菌体物种的优化富集技术。J. Vis. Exp. (2015)。本视频演示了分离 节杆菌属...

来源：Morales Vasquez, D.，等．利用报告基因表达的重组SARS-CoV-2对K18...

来源：Vijayraghavan, S., Kantor, B. 一种用于分裂细胞中CRISPR/Cas9介导基因敲除的整合酶缺陷型慢病毒载体的制备方案。J. Vis. Exp.

来源： Rustad, M., 等. 感染性噬菌体的合成 大肠杆菌-基于细胞的无细胞表达系统 视频实验杂志...

来源：Brauer, R. et al.，鸡胚中流感病毒的增殖。J. Vis. Exp.

来源：Nguyen, H., 等. 溶瘤单纯疱疹病毒的培养、纯化与滴定.J. Vis. Exp.

来源：Nguyen, H., et al. 溶瘤单纯疱疹病毒的培养、纯化与滴定。 J. Vis. Exp.

来源：Huang, D., 等．从野外采集的蚊子中分离蚊媒相关病毒．J. Vis. Exp．(2022)．本视频演示了逐步操作的完整流程 体外...

来源：Eggers, C. H. 噬菌体介导的莱姆病螺旋体 Borrelia burgdorferi 遗传操作。 J. Vis. Exp. (2022)。本视频演示了利用聚乙二醇介导的相分离技术，从 Borrelia burgdorferi...

来源： Pett, N., 等T4 噬菌体和 E. coli 小鼠肠道中的相互作用：研究宿主-噬菌体动态的典型模型 体内. 视频实验杂志...

来源：Van Lidth de Jeude, 等. 肠类器官慢病毒转导及下游分析实验方案。 J. Vis. Exp.

来源： Saragliadis, A., 等. 利用可切除抗生素抗性盒通过P1转导在Escherichia coli中实现基因缺失。J. Vis. Exp.

来源：Weger-Lucarelli, J., 等. 从新世界寨卡病毒感染性克隆中拯救与表征重组病毒. J. Vis. Exp. (2017)本视频展示了利用电穿孔技术拯救具有感染性的寨卡病毒的方法 体外...

来源：Mackler, R. M.，等．原型泡沫病毒整合体的组装与纯化．J. Vis. Exp. （2018）本视频展示了利用盐提取和尺寸排阻色谱法从混合的蛋白质-DNA...

来源：Suzuki, Y., et al. 利用实时定量聚合酶链式反应检测感染细胞培养上清液中的登革病毒RNA。 J. Vis. Exp. (2018)。本视频演示了为定量 PCR（聚合酶链式反应）分析制备病毒样本的步骤。病毒样本和 RNA 标准品经过连续稀释后，用蛋白酶 K 缓冲液处理，并在受控温度下孵育以释放 RNA。处理后的 RNA 随即被稳定化并储存，用于病毒 RNA...

来源：Dembowski, J. A., et al. 病毒DNA的纯化以鉴定相关病毒和细胞蛋白. J. Vis. Exp.

来源：Ding, J. et. al., 制备rAAV9以在小鼠心脏中过表达或敲低基因。J. Vis. Exp.

来源：Rghei, A. D.，等．用于大型动物模型临床前研究的细胞叠层生产腺相关病毒载体．J. Vis. Exp. (2021)本视频展示了利用化学裂解和离心法从转染的哺乳动物细胞中回收粗制腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）的操作流程，可为后续纯化及临床前基因治疗应用提供高产量的...

来源：Lopez Jr., M. A., 等. 重组原型泡沫病毒整合酶纯化过程中核酸酶污染的检测与去除. J. Vis. Exp.

来源： Vijayraghavan, S. 和 Kantor, B. 一种用于分裂细胞中CRISPR/Cas9介导基因敲除的整合酶缺陷型慢病毒载体的生产方案。J. Vis.

来源：Lopez Jr., M. 等. 重组原型泡沫病毒整合酶纯化过程中核酸酶污染的检测与去除。J. Vis. Exp. (2017)本视频演示了使用肝素 Sepharose 柱层析法纯化病毒整合酶以去除细菌核酸酶污染，并通过 SDS-PAGE...

来源： Biesbrock, A. M. 等 病毒的增殖 Homalodisca coagulata 病毒-01 通过 Homalodisca vitripennis 细胞培养 J. Vis. Exp. (2014)本视频展示了利用昆虫来源的宿主细胞进行柑橘木虱病毒-01（Homalodisca coagulata...

来源：Sahmi-Bounsiar, D. 等. 单细胞微吸法作为荧光激活细胞分选的替代策略用于巨型病毒混合物的分离。 J. Vis. Exp.

来源：Heidbuechel, J. P., 等. 针对肿瘤的副黏病毒免疫调节：体外设计与评估。J. Vis. Exp.

来源：Bou Khalil, J. Y.，等．利用Vermamoeba vermiformis从环境样本中快速分离新型福斯托病毒的策略．J. Vis. Exp.

来源：Chen, Z., 等. 利用二溴马来酰亚胺-二硫键化学法制备偶联诱导的荧光聚乙二醇化病毒样颗粒。J. Vis. Exp. (2018)本视频展示了噬菌体Q的可控表达方法β 经改造的衣壳蛋白 大肠杆菌...

来源：Gao, Y., et al. 呼吸道合胞病毒特异性核衣壳的生成与组装。J. Vis. Exp.

来源：Fricano-Kugler, C. J., 等．通过立体定位注射设计、包装和递送高滴度CRISPR逆转录病毒和慢病毒．J. Vis. Exp.

来源： Rustad, M. 等 合成具有感染性的噬菌体 大肠杆菌-基于细胞的无细胞表达系统 视频实验杂志 (2017)本视频演示了从大肠杆菌（E.

来源：Wang, M., 等，小鼠流感病毒A感染期间滤泡辅助性T细胞与生发中心反应的评估。 J. Vis. Exp.

来源：Asad, S., 等. 在原代人细胞中对寨卡病毒的抗体依赖性增强作用进行定量分析. J. Vis. Exp.

来源：Klaus, J. P., et al 测量沙粒病毒细胞吸附的高灵敏度检测方法。J. Vis. Exp.

来源：Fernández-Fernández, R., et. al. 从感染性沙门氏菌培养物中去除噬菌体。J. Vis. Exp. (2024)本视频展示了利用外源性LPS（脂多糖）作为受体模拟物使裂解性噬菌体失活的方法 沙门氏菌...

来源：Zhao, J., 等．马铃薯X病毒介导的microRNA沉默（VbMS）在马铃薯中的应用．J. Vis. Exp. （2020）本视频演示了利用 Agrobacterium tumefaciens...

来源：Esposito, A. M.，等．用于筛选HIV-1病毒膜融合抑制剂的高通量Cre-Lox激活病毒膜融合检测方法．J. Vis. Exp.

来源：Yates, J. G. E., 等。从羊水制备高滴度重组新城疫病毒。J. Vis. Exp.

来源：Otter, C. J., 等. 利用气液界面培养的原代鼻上皮细胞感染模型表征人冠状病毒与宿主相互作用。J. Vis. Exp.

来源：Krishnamurthi, R., 等. 通过转录组学研究温和型细菌噬菌体对其溶原菌的影响。J. Vis. Exp.

来源：Jamieson, T. R., 等. 利用高通量荧光成像检测假病毒感染中的SARS-CoV-2中和抗体。 J. Vis. Exp.

来源：Ruiz, A. J. 和 Russell, S. J. 基于microRNA的肠道病毒趋向性调控。J. Vis. Exp. (2017)本视频展示了使用合成 microRNA 模拟物选择性抑制培养的类上皮细胞中病毒复制的方法。重点介绍了通过 microRNA...

来源：Lucas-Hourani, M. 等.，RNA病毒广谱化学抑制剂的高通量筛选。J. Vis. Exp.

来源：Heidbuechel, J. P., 等. 用于肿瘤靶向免疫调节的副粘病毒：体外设计与评估。J. Vis. Exp.

来源：Kalveram, B., et al. 利用点击化学测量病毒感染对宿主细胞RNA合成的影响。J. Vis. Exp.

来源：Chiarella, A. M. et. al., 利用化学表观遗传修饰剂重定向细胞机制以抑制基因转录。J. Vis. Exp.

来源：Fuchs, M. et al. 腺病毒感染转染法：通过耗竭-拯救实验研究分子伴侣在细胞形态动力学中的作用。J. Vis. Exp.

来源：Zhang, J., et al. P. 解析病毒逃逸细胞因子产生过程中的先天免疫信号传导。 J. Vis. Exp.

来源: Zhang, J., et al. 解析病毒逃逸细胞因子产生的先天免疫信号通路. J. Vis. Exp.

来源：Zhang, L., 等．半翅目昆虫肠道中植物病毒与昆虫媒介蛋白的免疫荧光标记．J. Vis. Exp.

来源：Schaeffer, J. W., Chandler, 等. 利用阴离子交换树脂从生物气溶胶中检测病毒。 J. Vis. Exp.

来源：Yuan, M., 等．构建突变型痘苗病毒载体的一种简单高效方法．J. Vis. Exp.

来源：Williams, S. M. et al. 利用新型基于原子力显微镜的生物淘选技术分离肌萎缩侧索硬化症中TDP-43变体的形态特异性试剂。J. Vis. Exp.

来源：DeMarino, C.，等．远离病毒的高产量细胞外囊泡制备物的纯化．J. Vis. Exp.

来源：Van Lidth de Jeude, J. F., 等. 肠类器官慢病毒转导及下游分析方案. J. Vis. Exp.

来源：Chen, H. et. al. 利用腺病毒报告系统对体外和体内TGF-β/Smad3信号通路进行活细胞成像。J. Vis. Exp.

来源：Ren, S., et al. 丙型肝炎病毒复制分析方案. J. Vis. Exp.

来源：Stauffer, S. et al. 通过梯度离心法在体外拆解甲型流感病毒衣壳。J. Vis. Exp.

来源：Philip, A. A., 等 ，一种用于拯救表达报告蛋白的重组轮状病毒的简化反向遗传学方法。 J. Vis. Exp.

来源： Philip, A. A., et. al., 表达报告蛋白的重组轮状病毒的简化反向遗传学方法。J. Vis. Exp.

来源：Stauffer, S. et al., 通过梯度离心法在体外拆解甲型流感病毒衣壳。J. Vis. Exp. (2016)本视频展示了 pH...

来源：Moore, M. D., et al. 检测病毒衣壳结构完整性的替代体外方法。J. Vis. Exp.

来源： Tran, B. N., et. al. 利用高通量共聚焦成像技术追踪量子点偶联的SARS-CoV-2刺突蛋白三聚体在HEK293T细胞中的结合与内吞作用。J. Vis. Exp.

来源：Mateer, E., 等，负链RNA病毒感染中双链RNA与模式识别受体的共聚焦成像。J. Vis. Exp.

来源：Xu, C., et al. 建立慢性活动性EB病毒感患者NK细胞和T细胞系的高效简便方法。J. Vis. Exp.

来源：Cross, T.，等．从土壤样本分离物中分离Arthrobacter噬菌体物种的优化富集技术．J. Vis.

来源：Allaire, A., et al．利用免疫荧光监测人乳铁蛋白的细胞摄取及其对丙型肝炎病毒的抗病毒活性．J. Vis.

来源：Olety, B., et. al., 可视化HIV-1 Gag与巨大单层囊泡（GUV）膜的结合。 J. Vis. Exp.

来源：Lê-Bury, G., 等. 在感染HIV-1的活体人原代巨噬细胞中测量吞噬体迁移与速度。J. Vis. Exp. (2016)本视频展示了对感染 HIV-1 的人巨噬细胞进行活细胞共聚焦成像，通过 GFP 荧光和明场追踪技术来观察和量化吞噬体的迁移，从而揭示 HIV 如何在 Fc...

来源：Vacca, O., et al. 利用腺相关病毒作为研究疾病中视网膜屏障的工具。J. Vis. Exp.

来源：Vacca, O., et al. 利用腺相关病毒作为研究疾病中视网膜屏障的工具。 J. Vis. Exp.

来源：Moore, M. D., 等．用于测定病毒衣壳结构完整性的体外替代方法．J. Vis.

来源：Shah, R., et al. 单细胞多重荧光成像技术用于可视化病毒核酸与蛋白质并监测HIV、HTLV、HBV、HCV、寨卡病毒及流感病毒感染。J. Vis. Exp. (2020)本视频展示了利用分支DNA杂交与免疫荧光技术，在感染的人类淋巴细胞中同时可视化HIV-1...

来源：Pohl, M. O. & Stertz, S. 通过流式细胞术检测甲型流感病毒在 A549 细胞中的吸附与内化。《可视化实验杂志》（J. Vis.

来源：Niu, Y. D. 等。通过高通量条件评估噬菌体对食源性病原菌生物防控的有效性。 J. Vis. Exp. (2021)本视频演示了一种基于微孔板的检测方法，用于评估噬菌体混合物对大肠杆菌（E.

来源：Dembowski, J. A., Deluca, N. A. 纯化病毒DNA以鉴定相关的病毒和细胞蛋白。J. Vis. Exp.

来源： Hiller, T. et. al. 利用人肝细胞癌细胞系 HepG2 重建的三维肝脏模型中病毒载体的研究。J. Vis. Exp.

来源：Bou Khalil, J. Y., et al．利用 Vermamoeba vermiformis 从环境样本中快速分离新型 Faustovirus 的策略．J. Vis. Exp.

来源：Vallery, T. K. & Steitz, J. A. KSHV感染细胞中特定基因产物的定量荧光原位杂交（FISH）与免疫荧光（IF）。J. Vis. Exp.

来源：Rghei, A. D., et al. 大型动物模型临床前研究中利用细胞堆栈生产腺相关病毒载体。J. Vis. Exp.

来源：Rozelle, D. K., 等. 用于定量基因表达各阶段病毒功能的痘苗病毒报告病毒. J. Vis. Exp.

来源：Zeigler Allen, L., et al. 利用“单病毒基因组学”进行单个病毒颗粒的分离与基因组分析。J. Vis. Exp.

来源：Kalveram, B. 等。利用点击化学检测病毒感染对宿主细胞RNA合成的影响。J. Vis. Exp.

来源：Marzook, N. B., 等，高效生成荧光标记的痘苗病毒蛋白的方法。J. Vis. Exp.

来源：Blancett, C. D.，等．生物安全条件下利用胶囊对病毒样本进行负染色的方法．J. Vis. Exp.

来源： Chen, C. C., 等. 利用化学偶联方法对戊型肝炎病毒纳米颗粒进行表面功能化. J. Vis. Exp.

来源：Contreras, D., et al. 寨卡病毒体外感染细胞培养系统及干扰素的体外预防作用。 J. Vis. Exp.

来源： Rustad, M., 等. 在体外合成具有感染性的噬菌体 大肠杆菌-基于细胞的无细胞表达系统 视觉实验杂志.

来源： Jamieson, T. R., et al. 利用高通量荧光成像检测SARS-CoV-2中和抗体的伪病毒感染。 J. Vis. Exp.

来源：Yuan, M., 等．构建突变型痘苗病毒载体的一种简单高效方法．J. Vis. Exp.

来源：Liu, P., et al。利用重组蚊媒浓核病毒作为基因递送载体对蚊子幼虫基因进行功能分析。J. Vis. Exp. (2017)。本视频演示了从感染的埃及伊蚊（Aedes...

来源：Philip, A. A.,...

来源：Prasad, M. et al. 利用腺相关病毒-Cas9系统体外建立基因工程小鼠头颈部癌细胞系。J. Vis. Exp.

来源：Ehrke-Schulz, E., 等. 基于人5型腺病毒的高容量腺病毒载体的克隆与大规模生产。J. Vis. Exp.

来源：Chang, X., et al. 利用磷酸钙转染法构建假型H5亚型禽流感病毒及抗体中和活性检测. J. Vis. Exp.

来源：Nishitsuji, H., et al. 建立乙型肝炎病毒报告系统以监测复制周期的早期阶段。J. Vis. Exp.

来源： Liu, P., 等利用重组蚊媒细小病毒作为基因递送载体对蚊虫幼虫基因进行功能分析 J. Vis. Exp. (2017)本视频展示了利用编码 microRNA 的重组蚊媒浓核病毒在蚊子幼虫中沉默特定基因的方法。被感染的早期幼虫可产生具有功能的...

来源：Eggers, C. H. 噬菌体介导的莱姆病螺旋体Borrelia burgdorferi的遗传操作。J. Vis. Exp.

来源：Van Lidth de Jeude, J. F., 等. 肠类器官的慢病毒转导及下游分析实验方案. J. Vis. Exp.

来源：Chen, H., et al. 利用腺病毒报告系统对体外和体内TGF-β/Smad3信号通路进行活细胞成像。 J. Vis. Exp.

来源：Meister, T. L., et al. 一种用于制备高滴度戊型肝炎病毒储备液的细胞培养模型。J. Vis. Exp.

来源：Rim, Y. A., et al. 利用仙台病毒与离心法由血细胞生成诱导性多能干细胞。J. Vis. Exp.

来源：Ehrke-Schulz, E., 等. 基于人5型腺病毒的高容量腺病毒载体的克隆与大规模生产。J. Vis. Exp.

来源: Lu, A., 等. 啮齿类动物心脏中的病毒转基 因表达及心脏心律失常风险评估. J. Vis. Exp.

来源：Hiller, T., 等. 利用人肝细胞癌细胞系 HepG2 重建的三维肝脏模型中病毒载体的研究. J. Vis. Exp.,...

来源： Kubala, M. H. & DeClerck, Y. A. 利用癌细胞系中基因表达的条件性敲低研究单核细胞/巨噬细胞向肿瘤微环境的募集 J. Vis. Exp.

来源：Ding, J., et al. 制备rAAV9在小鼠心脏中过表达或敲低基因. J. Vis. Exp.

来源：McAllister, S. C., Hanson, R. S., 等．一种用于研究卡波西肉瘤相关疱疹病毒诱导细胞转化的体外模型．J. Vis. Exp.(2017)本视频展示了利用HPV16...

来源：Koza, P., 等。利用慢病毒载体方法生成转基因大鼠。J. Vis. Exp.

来源：Zhang, Y., 等，小鼠成纤维细胞直接重编程为黑色素细胞。J. Vis. Exp.

来源：Hoenen, T., et al. 利用含四顺反子微基因组的病毒样颗粒在生物安全二级条件下模拟埃博拉病毒生命周期。 J. Vis. Exp.

来源：Heidbuechel, J. P., Engeland, C. E. 副黏病毒用于肿瘤靶向免疫调节：体外设计与评估。J. Vis. Exp.

来源： Zjablovskaja, P., 等小鼠髓系前体32D/G-CSF-R细胞的增殖与分化 J. Vis. Exp.

来源：Bouillier, C. et. al.，重组呼吸道合胞病毒的扩增与滴定。J. Vis. Exp.

来源：Natilla, A., 和 Hammond, R. W. 在烟草本塞姆氏植物中产生的玉米粗缩病毒样颗粒上半胱氨酸残基的溶剂可及性分析及多肽与病毒样颗粒的交联。J. Vis. Exp. (2013)本视频展示了利用巯基反应性染料对中国本氏烟草（Nicotiana...

来源：Chen, Z., et al. 利用二溴马来酰亚胺-二硫键化学法构建偶联诱导型荧光聚乙二醇化病毒样颗粒。J. Vis. Exp.

来源：Yun, S. et al. 细菌人工染色体：正链RNA病毒研究的功能基因组学工具。J. Vis. Exp.

来源： Chang, X., 等 利用磷酸钙转染法制备假型H5亚型禽流感病毒及抗体中和活性检测 视频实验杂志...

来源：Chang, X., 等. 利用磷酸钙转染法构建假型H5禽流感病毒及抗体中和活性检测. J. Vis. Exp.

来源：Klaus, J. P. et al. 一种用于检测沙粒病毒与细胞结合的高灵敏度检测方法。J. Vis. Exp.

来源：Ren, S., 等．丙型肝炎病毒复制分析方案．J. Vis. Exp. （2014）本视频演示了使用定量反转录 PCR 对感染细胞培养物中的丙型肝炎病毒 RNA...

来源：Kadoya, S., Sano, D. 轮状病毒特异性生长速率和细胞结合能力的检测方法。J. Vis. Exp.

来源：Fout, G. S, Cashdollar, J. L. 美国环保局方法 1615：通过培养法和反转录定量聚合酶链式反应检测水中肠道病毒和诺如病毒的存在。II. 全可培养病毒检测法。可视实验杂志...

来源： Scarborough, R. J., et al. 针对HIV-1产生的RNA在基因或药物治疗中应用的疗效与毒性评估。 J. Vis. Exp.

来源：Manocheewa, S., 等. 用于确定人类免疫缺陷病毒复制适合度的成对生长竞争实验。 J. Vis. Exp.

来源：Vijayraghavan, S.，等。用于CRISPR/Cas9介导分裂细胞基因敲除的整合酶缺陷型慢病毒载体的制备方案。 J. Vis. Exp.

来源：Krishnamurthi, R., et al. 通过转录组学研究温和噬菌体对其溶原菌的影响。J. Vis. Exp. (2024)。本视频展示了溶原性细菌中噬菌体自发诱导的时间序列计数方法 铜绿假单胞菌...

Source: Frias-De-Diego and A., Crisci, E. Use of Crystal Violet to Improve Visual Cytopathic Effect-based Reading for Viral Titration using TCID50 Assays. J. Vis. Exp., (2022)This video demonstrates a crystal violet staining method to visualize cytopathic effects in virus-infected cell cultures. The pattern of stained and unstained wells across serial dilutions enables rapid, cost-effective estimation of the viral infectious dose.

来源： Jamieson, T. R., et al., 利用高通量荧光成像检测伪病毒侵染以鉴定SARS-CoV-2中和抗体。J. Vis. Exp.

来源：Ren, S., 等. 丙型肝炎病毒复制分析方案. J. Vis. Exp.

来源：Bouillier, C., et al. 重组呼吸道合胞病毒的制备、扩增与滴定。 J. Vis. Exp.

来源：Claiborne, D. T. 等。一种基于限制性内切酶的克隆方法评估 HIV-1 C 亚型 Gag-MJ4 嵌合病毒的体外复制能力。J. Vis. Exp.

来源：Garcia, V.，等．表达荧光素酶的重组病毒高通量滴定．J. Vis. Exp. (91)，e51890，doi:10.3791/51890...

来源：Baer, A. 和 Kehn-Hall, K. 通过空斑实验测定病毒浓度：传统与新型覆盖系统的应用。J. Vis. Exp.