利用pH控制梯度离心法在体外拆解甲型流感病毒核心

取含有无去垢剂甘油的离心管。
对于对照样品，加入高浓度、无去垢剂且pH为中性的甘油。
对于测试样品，加入含有去垢剂并调节至不同pH值的高浓度甘油。
在其中覆盖含有脂质包膜以及由基质蛋白和核糖核蛋白组成的内核的甲型流感病毒（IAV）。
进行超速离心。
在对照组中，病毒穿过无去垢剂的梯度并以完整病毒颗粒形式沉淀。
在测试样品中，下层的去垢剂溶解病毒包膜，但不破坏其内核结构。
在中性pH条件下，完整的内核保持稳定并发生沉淀。
在轻度酸性pH条件下（模拟早期内涵体环境），基质蛋白解离，仅留下核糖核蛋白沉淀。
在更强的酸性pH条件下（模拟晚期内涵体环境），病毒内核完全解体，无任何组分发生沉淀。
这使得可在体外分析不同pH条件下甲型流感病毒（IAV）内核的解离过程。

使用一个5毫升的注射器和一根针头，向6根超透明离心管中各加入3毫升15%甘油溶液。每步操作后均需用双蒸水清洗针头。

使用一个5毫升注射器和一根长针头，小心地将3.4毫升25%甘油溶液注入15%甘油层下方，注意避免混合两层液体。两层之间会形成清晰可见的界面。针对所有六种条件，均重复此操作，并分别使用pH值已调节的甘油溶液进行测试。

接下来，在II级生物安全柜中，取1毫升含有甲型流感病毒的澄清稀释羊水液，轻柔地覆盖在甘油梯度上。将离心管放入转子吊桶中，对称位置的离心管配平后，小心放入预冷的SW-41超速离心转子中。在12摄氏度条件下以21,000 rpm离心150分钟。