可视化pH对甲型流感病毒核心溶解作用的影响

从经过不同 pH 条件（从中性到酸性）处理的纯化甲型流感病毒核心组分开始。
病毒核心组分包含基质蛋白和核蛋白。
加热样品以使蛋白质变性。
将样品上样至聚丙烯酰胺梯度凝胶。
启动电泳，根据分子量分离蛋白质，形成清晰的条带。
将凝胶置于固定液中孵育，以固定蛋白质。
洗涤以去除固定剂，加入胶体考马斯亮蓝染料并孵育。染料与蛋白质结合，使条带得以显色。
去除染料并进行脱色洗涤，以增强条带的可见性。
获取凝胶的高分辨率图像。
在中性 pH 条件下，基质蛋白和核蛋白条带信号较强，表明病毒核心保持完整并保留相关蛋白。
随着 pH 降低，条带信号强度逐渐减弱。
这表明酸性条件会触发病毒核心的解离，并在纯化过程中促进蛋白质的溶解。

进行SDS-PAGE时，将所有样品在95摄氏度加热10分钟。取20微升溶解后的沉淀样品加入预制的Bis-Tris梯度迷你胶中，在1X MOPS SDS电泳缓冲液中以200伏电压运行1小时。

将凝胶在固定液中孵育1小时。用去离子水冲洗1至2次，然后在15厘米的细胞培养皿中加入足量的胶体考马斯亮蓝溶液，在室温下轻轻振荡过夜染色。

用双蒸水脱色凝胶，每15至20分钟更换一次液体，直至凝胶背景变清晰。将凝胶置于双蒸水中，于4°C保存，直至进行条带定量扫描。