0 次观看 • 3:24 分钟 • August 31st, 2026
取含有病毒衣壳的离心管，病毒衣壳是不含遗传物质的类病毒颗粒。
将试管在恒定温度下加热不同时间。
较短的加热时间会对衣壳蛋白产生轻微的应激作用，而长时间加热则会破坏衣壳并导致聚集。
迅速冷却试管，以防止进一步的结构变化。
将液体转移至石蜡膜上。
将透射电子显微镜（TEM）载网放置于液滴上，衣壳会附着在载网表面。
用滤纸轻触载网以去除多余液体。
用缓冲液洗涤以去除未牢固结合的衣壳，然后再次用滤纸吸去多余液体。
浸入醋酸铀酰溶液中，这是一种重金属染色剂，可结合衣壳表面，使其在透射电子显微镜下呈现更暗的形态。
用滤纸吸去网格上的液体，并将其放置在培养皿上。将培养皿存放在干燥器中以去除水分。
使用透射电子显微镜（TEM）对网格进行成像，以观察热诱导的衣壳损伤。
进行热处理时，用磷酸盐缓冲液（PBS）替代10毫摩尔的HEPES（pH 7.4），处理后不再进一步稀释衣壳。随后，将全部约15微升的处理后衣壳溶液滴加到石蜡膜上。用镊子夹住载网边缘，使镊子闭合并固定载网，将载网碳膜面朝下放置于处理后的溶液液滴上。
将载网孵育10分钟，使衣壳蛋白结合到载网上。根据衣壳蛋白制备物的纯度，可在处理后的衣壳液滴后方依次添加10至15微升的HEPES溶液液滴进行洗涤。孵育10分钟后，用镊子夹起带有液滴的载网。
将载网几乎垂直地接触一片滤纸，以吸去液滴。然后用载网吸取10至15微升HEPES缓冲液液滴，保持30秒。洗涤30秒后，用另一片滤纸吸去缓冲液。
接下来，在石蜡膜的空白区域滴加15 µL的2%醋酸铀酰溶液。用载网捞取醋酸铀酰液滴，静置45秒。然后用滤纸吸去醋酸铀酰溶液，确保去除大部分液体。
将网格碳面朝上放置在一片滤纸上，注意避免网格粘附在镊子上的湿气中。然后，将带有网格的滤纸放入敞开的玻璃培养皿中。对所有处理重复此步骤后，将装有网格的培养皿半片置于干燥器中过夜干燥，然后再进行透射电子显微镜观察。