使用外源脂多糖灭活噬菌体以获得无噬菌体的Salmonella培养物

从含有以下成分的悬液开始 沙门氏菌，一种致病的 细菌

细菌细胞先前已暴露于一种裂解性噬菌体，该噬菌体会结合细菌表面的脂多糖（LPS）以启动感染。

该悬液含有未感染的细胞和少量已感染的细胞。

引入一种外源性LPS，其作为竞争性受体发挥作用。

孵育以使感染的细胞裂解并释放子代噬菌体。

这些噬菌体与外源性脂多糖（LPS）不可逆地结合，导致噬菌体失活，从而阻止其对未感染细胞的再次感染。

将悬液转移至离心管中，离心沉淀细胞。

弃去含有LPS-噬菌体复合物的上清液。

加入培养基，离心细胞以去除残留的噬菌体和脂多糖（LPS）。

将细胞重悬于培养基中，并进行第二次LPS处理，以确保噬菌体完全失活。

该方法利用外源性LPS使噬菌体失活，同时保持细菌的活性。

将细胞重悬于1 mL的2倍浓度LB培养基中。
接着，将市售的Salmonella enterica 脂多糖（LPS）与1 mL过滤过的LB培养基中的20 µL细菌悬液混合。
在37摄氏度、200 rpm振荡条件下孵育混合物2小时，以防止噬菌体再次感染。
随后，将1 mL培养物转移至微量离心管中，在10,354 g 条件下离心2分钟。
用1 mL过滤过的LB培养基洗涤沉淀物3次。
洗涤后，将沉淀物重悬于1 mL的2倍浓度LB培养基中。
取20 µL该混合液加入含有0.8 mg/mL市售LPS的1 mL过滤LB培养基中，并在37摄氏度、200 rpm条件下孵育2小时。