0 次观看 • 3:00 分钟 • August 31st, 2026
从一块多孔板开始，其中含有在营养丰富的肉汤中进行系列稀释的噬菌体悬液作为处理组，以及不含噬菌体的肉汤作为对照组。
添加 E. coli 向每个孔中加入。使用分光光度计测量初始光密度（OD），以记录初始细菌浓度。
接下来，将培养板置于适宜条件下孵育，以促进细菌生长及噬菌体感染。
在对照组中，细菌利用营养物质并增殖，导致光密度（OD）升高。
在处理过程中，噬菌体结合细菌表面受体并将基因组注入细胞质中。
利用宿主细胞的机制，病毒基因组进行复制并产生病毒蛋白，这些蛋白组装成新的病毒颗粒。这些颗粒裂解细胞，释放出子代病毒。
定时测量光密度以比较细菌生长情况。
对照孔的光密度值呈逐步上升趋势，而噬菌体处理孔的光密度值较低，且随着噬菌体浓度升高，光密度降低更为明显。
这有助于确定实现最大细菌生长抑制所需的噬菌体浓度。
首先，使用带滤芯的吸头设置微量滴定板实验，以避免交叉污染。在96孔微量滴定板的第1至第12列各孔中加入180 µL mTSB。然后，在无菌96孔微量滴定板的第1至第8列中对每种噬菌体进行连续十倍稀释，以建立实验体系。向微量滴定板最上方A行的第1至第8孔中分别加入20 µL的单个噬菌体或噬菌体混合液。
对于无噬菌体的对照组和空白对照组，在第9至12列的第一行孔中加入20微升mTSB。移液时，通过轻柔且重复的吸打至少5次混匀孔内液体，并在每次稀释之间更换吸头。从最后一行H中移除20微升液体，然后使用1毫升移液器将2至3毫升稀释后的菌液转移至储液槽中，为待测细菌菌株建立一个储液槽。
使用多通道移液器，将稀释后的细菌培养物各 20 微升加入第 1 至第 10 列的每个孔中，每次加样后更换吸头。盖好后于 37 摄氏度培养微孔板。每隔两小时将微孔板从培养箱中取出，使用微孔板读数仪读取数据。
或者，将培养板置于酶标仪中孵育，并随时间连续读取数据。