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DOI: 10.3791/2464-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
急性心肌梗死(AMI)大鼠模型是有用的研究对心脏的病理生理及生理功能的心肌梗死的后果。
该程序的总体目标是模拟大鼠的急性心肌梗死,以研究与心肌对心肌缺血的立即反应相关的心脏信号机制,然后是再灌注损伤。这些反应包括梗死面积、风险区域和细胞死亡。第一步是在胸部左侧的第四肋间隙做一个小切口,并在隔离后展开肋骨,从而暴露左心室。
缺血期后,左前降支或 LAD 瞬时结扎 30 分钟。LAD 的结扎被释放,允许在 4 小时的再灌注期后进行心脏再灌注。在切除心脏之前再次结扎 LAD,并检查有风险和无风险的梗死心肌区域的大小。
最终,来自梗死的组织学评估结果。心肌可用于探索治疗心力衰竭的治疗策略。该技术可以深入了解与缺血的即时反应相关的信号传导机制,然后是严重的损伤,例如梗死面积、风险区域和细胞死亡。
该模型可用于评估治疗缺血性心脏病的新型治疗策略。演示该程序的将是来自德克萨斯医学中心机构成员休斯顿大学药理学和制药科学系 Bradley McConnell 博士实验室的高级研究助理和 X 高级博士后研究员。在手术开始之前,必须用 70% 乙醇对手术表面进行消毒。
在每次手术前,用热珠消毒器对所有手术器械进行消毒。所需的器械包括两把手术剪刀、一把镊子、一把弯曲的镊子、两个持针器和一个胸部牵开器。调整顺势主题毯系统的温度,使其将动物的体温保持在 37 摄氏度或正负 1 摄氏度。
梗塞的大小取决于闭塞的持续时间以及体温。准备好棉纱布和涂抹器以处理出血。这些研究仅使用通过目视检查、心率、呼吸频率、体温和体重测量通过体格检查的动物。
记录将在手术前一天接受手术的健康动物的体重和识别特征。服用一定剂量的丁丙诺啡口罩。在整个手术过程中必须穿着防护服和手套,并且必须在个别手术之间更换手套。
首先麻醉大鼠并通过彻底剃掉颈部和胸部区域的皮毛来准备手术部位。用 Betadine 溶液消毒剃须区域,然后用 70% 乙醇消毒。重复此过程 3 次。
将动物放在顺势主题毯系统上,以适当维持体温。躺在它的右侧。聚乙烯管边缘的斜面使插入喉部更容易。
在手术立体显微镜的帮助下插入气管插管。根据需要轻轻地纵舌头并保持气管在视线范围内。将气管插管连接到呼吸机,呼吸机以每分钟 80 次呼吸的速度循环,潮气量为每 100 克体重 1.2 毫升。
一旦实现机械通气,将无菌窗帘放在大鼠身上,只留下手术区域暴露。一旦建立稳定的呼吸,在左侧第四肋间隙打开胸部。尽量减少切入组织的程度,以降低出血的风险。
将胸部牵开器置于第四肋间隙内,并张开肋骨以暴露左心室或 LV 必须注意不要损伤肺。接下来,打开心包,将其留在原位。如果可能,使用外科立体显微镜识别左前降支或 LAD 近端动脉。
短暂地、结扎或打结 LAD 以诱发缺血。注意不要把心脏适当地外露出来。通过观察缝合线远端心肌组织褪色以及缺血期前壁功能障碍来确认 LAD 结扎。
缺血期 30 分钟后,用显微外科剪刀剪断或松开 LAD 周围的结扎线,开始心脏再灌注。再灌注通过红色返回到心肌组织和证明在释放 LAD 结扎后立即观察到的前壁运动恢复来验证。该程序与假对照大鼠相同,只是 LAD 没有瞬时连接。
拆下胸部牵开器,用间断的缝合模式将肋骨拉在一起。肋骨闭合后,从胸腔吸入空气,产生负胸压以确保正常呼吸。最后,用连续缝合模式闭合皮肤 手术后,将大鼠放入带有加热垫和水的笼子中,通过直肠温度计监测体温,通过目视检查监测呼吸频率,通过心悸和异常疼痛迹象监测心率,直到动物可以走动。
应给予无菌盐水。如果观察到脱水迹象,手术后立即给予丁丙诺啡。4 小时再灌注期后,将重新麻醉的大鼠放回手术区域。
如前所述,可视化左心室并第二次结扎 LADA,否则可以恢复活结。将 1 毫升 5% 伊文思蓝和生理盐水注入右心室,灌注 2 分钟。在此期间后,将 1 毫升饱和氯化钾溶液注入右心室以阻止心脏快速跳动,切除心脏并将其嵌入加热的 2% 抗原磷酸盐缓冲盐水中。
一旦 agro 在室温下凝固,将心脏切成 1 到 2 毫米的部分。用 2%trien tetra oleum chloride 或 TTC 对活心肌染色 20 分钟,并捕获所见每个切片的图像。这是鼠心的代表性图像。
再灌注 4 小时后,蓝色区域表示未闭塞或无风险的灌注区域。红色区域表示有梗死风险的区域,白色黄色区域表示有风险区域内的心肌梗死。看完这个视频,你应该对大鼠急性心肌梗死和用于模拟人类缺血性心脏病的动物模型有一个很好的了解。
该模型可用于研究对缺血的即时反应,然后在最初几个小时内再灌注损伤,例如梗死面积、面积风险和细胞死亡。正如您在本视频中所观察到的,祝您的实验好运。
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