0 次观看 • 3:17 分钟 • August 31st, 2026
取一株溶原性细菌的过夜培养物，其中大多数细胞基因组内含有处于休眠状态的噬菌体DNA。
将其接种至新鲜培养基中并进行培养。
某些细菌会经历自发诱导，进入裂解周期，在此过程中噬菌体DNA被切除、复制，并产生病毒蛋白。
新组装的感染性噬菌体通过细胞裂解释放。
在规定的时间间隔收集培养样品。
为计数存活的非诱导溶原菌，将各样品的连续稀释液分别点样于琼脂平板上并进行培养。
计数菌落以计算菌落形成单位（CFUs）。
为了计数感染性噬菌体，将相同稀释度的样品点样到预先接种了抗生素抗性指示宿主细胞的含抗生素琼脂平板上。由于溶原菌对抗生素敏感，只有抗性宿主能够生长。
噬菌体感染并裂解细胞，形成清晰的噬菌斑。
计数噬菌斑以计算噬菌斑形成单位（PFUs）。PFUs 越低，表明自发诱导事件越少。
绘制菌落形成单位（CFU）和噬菌斑形成单位（PFU）随时间的变化曲线。在细菌生长的早期指数阶段，PFU相对于CFU最低，表明此时自发性噬菌体诱导最少。
实验开始时，将过夜培养物按1:100的比例接种于100毫升LB培养基中，制备新鲜的溶原菌和指示菌培养物。在37摄氏度下以180转/分钟的转速振荡培养。
为监测溶原菌生长，从接种时起每小时采集一毫升样品，持续八小时。将样品进行连续稀释：取100 µL加入900 µL LB培养基中。充分涡旋振荡至最高速度，随后继续进行10⁻¹至10⁻⁹的系列稀释。
取10 µL所需稀释液点样于LB琼脂平板上。待其干燥后，于30 °C培养18至24小时。培养结束后，计数菌落数量，并利用给定公式计算活菌细胞数量。
接下来，为了定量测定时间样品中的感染性噬菌体颗粒，将100 µL对数期的利福平抗性指示宿主细胞加入融化的顶层琼脂中，并加入利福平。将经连续稀释的溶原菌培养物各10 µL点样至接种后的顶层琼脂层上。待其干燥后，在37 °C孵育18至24小时。
孵育后，计数噬菌斑数量，并使用给定公式计算感染性噬菌体颗粒数。