小鼠经鼻感染鼠疱疹病毒以评估宿主免疫应答

以一只健康且已麻醉的小鼠开始，将其置于适合进行呼吸道给药的位置。

通过鼻内途径给予小鼠疱疹病毒以启动感染。

病毒通过呼吸道传播并到达肺部。

在肺部，该病毒会感染肺上皮细胞并释放其核衣壳。

病毒基因组进入细胞核并转录为病毒RNA。

宿主细胞质中的感受器识别病毒RNA，并启动信号通路以激活特定的转录因子。这些因子随后促进细胞因子基因的表达，从而导致抗病毒细胞因子的产生。

感染后，解剖已处死的小鼠并采集肺组织。

将一个肺叶放入含有二氧化硅珠的离心管中，并加入冷的培养基。

通过匀浆组织以破坏细胞，释放包括抗病毒细胞因子在内的细胞内成分。

将匀浆液在冰上冷却，然后重复匀浆步骤，以确保组织完全破碎。

离心以沉淀细胞碎片。

收集含有抗病毒细胞因子的上清液，以评估宿主对疱疹病毒感染的免疫应答。

将40微升含40个空斑形成单位的天然小鼠病原体γ疱疹病毒68（gamma herpes virus 68）经鼻接种至已麻醉的C57-black-six小鼠。在感染后的实验时间点处死小鼠，沿胸骨作左侧横向切口打开胸腔，用锋利的剪刀剪开肋骨，收集肺组织。

将左肺叶放入含有500微升1.0毫米氧化锆-二氧化硅珠的无菌1.5毫升螺口管中。加入1毫升冰冷的无血清DMEM，通过珠磨法均质化肺组织30秒。

将离心管置于冰上冷却两分钟，然后再次进行一次珠击破碎。随后在4 °C下离心离心管，并收集上清液。现在根据制造商的说明书，使用市售的细胞因子ELISA试剂盒检测所需的细胞因子。