病毒颗粒的浓缩与纯化

取含有病毒颗粒与宿主细胞碎片混合的悬液。

离心以沉淀较大的碎片。收集上清液，其中含有病毒颗粒以及较小的碎片。

过滤上清液以去除残留的较小碎片。

向滤液中加入含有聚乙二醇（PEG）的盐溶液。翻转试管以混匀，并进行孵育。

PEG 作为一种分子拥挤剂，可促使病毒颗粒相互靠近，从而促进其沉淀。

同时，盐通过中和病毒颗粒之间的静电排斥作用，促进其聚集。

离心试管以沉淀病毒聚集体。弃去富含聚乙二醇的上清液。

重复离心，并弃去残留的上清液。

加入缓冲液，在振荡条件下孵育以重悬沉淀。

将含有病毒颗粒的悬液分装，并于超低温条件下保存，以维持病毒的结构完整性和感染性。

将病毒上清液在2000 × g离心10分钟。随后通过0.45 µm低蛋白结合注射器滤器（PES或PVDF）过滤，以纯化病毒培养基。接着，向培养基中加入5×聚乙二醇6000溶液。反复倒置试管数次以混匀。然后将含有病毒的混合液在4 °C孵育至少12小时。

第9天，将病毒混合液在2500 × g 条件下离心45分钟。45分钟后，弃去上清液，再以2分钟短离心。随后再次移除上清液。之后，加入320 µL无菌PBS重悬沉淀，并在室温下于摇床上孵育30分钟。次日，将病毒分装（每份5–10 µL），并于-80 °C冷冻保存。