Name: 从特定的大脑区域的RNA或蛋白质提取大鼠脑微解剖 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: 学习大鼠脑微解剖技术，从特定脑区快速分离嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体，用于神经退行性疾病研究。该方法可有效防止RNA和蛋白质降解，确保样本质量。

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步骤 1
根据既定方案处死大鼠。取出颅腔内的脑组织，并用冰冻的经DEPC处理的Milli Q水冲洗，以去除表面血液。
步骤 2
将脑置于冰冷的金属板上，沿中线将脑组织切成左右两半。 <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_3/269_Figure-01.png" alt="脑解剖示意图；显示胼胝体、穹窿及用于解剖学研究的切割顺序。" width="474" height="224" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="269_Figure-01">
图1. 大鼠半球内侧视图的切割位置  
步骤 3
在第一次切割后立即采集嗅球。将样本在液氮中速冻，并于 -80°C 保存。 <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_4/269_Figure-02.png" alt="绵羊脑嗅球解剖；解剖学研究，标注图像。" width="564" height="145" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="269_Figure-02">
图2. 嗅球解剖
步骤 4
使用刀片和Dumont 5号镊子在第二次切割后立即采集额叶皮层。将样本在液氮中快速冷冻，并于-80°C保存。 <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_5/269_Figure-03.png" alt="额叶皮层解剖；实验性脑解剖学研究；精确的组织提取方法。" width="566" height="220" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="269_Figure-03">
图3. 前额叶皮层解剖
步骤 5
在第三次切割后，使用两把Dumont No.5镊子立即采集纹状体（尾状核）。将样本在液氮中速冻，并于-80°C保存。 <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_6/269_Figure-04.png" alt="大鼠纹状体及周围组织的解剖示意图，突出显示解剖学细节。" width="555" height="208" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="269_Figure-04">
图4. 纹状体（尾状核）解剖
步骤 6
采集海马体时，将脑组织腹面朝上，移除中脑以暴露海马体。使用两把Dumont No.5镊子将海马体从皮层中分离。将样本在液氮中速冻，并于-80°C保存。 <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_7/269_Figure-05.png" alt="解剖步骤示意图，显示用于神经生物学研究分析的海马体提取过程。" width="559" height="191" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="269_Figure-05">
图5. 海马体解剖

<ol><li>Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).</li>
<li>Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).</li>
</ol>

动物的处理遵循香港大学教学与科研用活体动物使用委员会（CULATR）批准的动物研究使用方案，以及美国国立卫生研究院关于动物使用的指南。

不同的脑区与不同的神经退行性疾病相关。例如，额叶皮层和纹状体与帕金森病相关，而海马体则与阿尔茨海默病相关。对脑组织进行精确的显微解剖，可使我们更准确地检测病变区域中 mRNA 和蛋白质的变化。

<table><tbody><tr><td>显微镜</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>解剖工具</td><td></td><td></td><td>金属板、镊子、刀片等。用铝箔单独包裹后，在180°C加热八小时以去除RNase，使用前置于冰上冷却。</td></tr></tbody></table>

大鼠脑组织显微解剖用于特定脑区的rna或蛋白质提取

Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region

大鼠脑组织的微解剖分离成不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行微解剖分离的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧，以避免组织中RNA和蛋白质的降解。  
关键词：微解剖，大鼠脑，嗅球，额叶皮层，纹状体，海马体，RNA降解，蛋白质降解

将大鼠脑组织精细解剖为不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频展示了在新鲜大鼠脑组织中对四个主要脑区——嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体——进行显微解剖的操作过程。同时提供了快速分离各脑区的实用技巧，以避免组织中RNA和蛋白质的降解。

大鼠脑组织显微解剖用于特定脑区的RNA或蛋白质提取

将大鼠脑组织精细解剖为不同区域对于研究多种神经退行性疾病至关重要。本视频演示了……

您好，我是来自香港大学解剖学系的Quint。今天我将介绍如何将小鼠大脑精细解剖为四个主要部分：前脑、嗅皮层、海马体及皮层下层。以下是展示我们如何解剖大脑的示意图。共有三个切面。第一个切面位于嗅球与额叶皮层的连接处。第二个切面位于胼胝体的中部。第三个切面位于语音区的前部尖端。经过三次切割后，将得到四条脑通路。左侧为一个因子。右侧为海马体。额叶皮层位于第一刀和第二刀切口之间。编码核酸酶位于新鲜脑半球第二刀与第三刀切口之间，属于stratum的一部分。首先识别胼胝体和听觉皮层非常重要。随后我们便可以轻松定位三个切面。第一个切面位于嗅球与额叶皮层的连接处。第二个切面位于胼胝体的某一部位，第三个切面位于脑神经的前部末端。我们将解剖大脑和显微镜。解剖工具需保持在冰上保存。用冰预冷的DEPC水冲洗后，将脑组织置于冰预冷的金属板上，沿中线切开分为左右两个半球，分离并收集前额叶皮层组织，立即放入液氮中保存。随后开始采集前额叶皮层：在胼胝体前缘尖端周围进行切割，切取额叶皮层组织，收集后储存于液氮中。接下来，我们解剖该脑组织样本。在前连合、视束和前联合纤维平面进行切割，分离出壳核，收集该组织，并将其保存于液氮中。最后，我们将解剖海马体。首先，我们需要去除中脑，以便充分暴露海马体。将分离出的海马体收集并储存在液氮中。不同脑区与不同的神经退行性疾病相关。例如，黑质与帕金森病相关，而额叶皮层和海马体则与阿尔茨海默病相关。精确的脑部显微解剖使我们能够检测该区域内的 mRNA 和蛋白质变化。

micro-dissection-rat-brain-for-rna-or-protein-extraction-from

Research

科研

JoVE Journal

Biology

生物学

从特定的大脑区域的RNA或蛋白质提取大鼠脑微解剖

对小鼠脑部特定区域进行RNA表达谱分析，需要精确且可重复的组织采集策略。本文描述了一种结合冠状面脑切片与组织打孔器辅助显微解剖的技术方案。从所获样本中提取的总RNA产量与质量验证了该方法的实用性。...

一种无需激光捕获显微切割的小鼠脑区精细分离方法，用于总RNA提取及后续的高通量测序与基因表达谱分析

我们描述了一种创伤后应激障碍（PTSD）的大鼠模型，该模型揭示了神经内分泌功能的持续性改变以及延迟出现的长期过度恐惧反应，这些特征与PTSD患者的表现一致。本文所述的动物模型和方法可用于关联脑核团中的生物标志物（具有机制性意义但无法在患者中检测）与外周白细胞中的生物标志物（可检测）。...

用于揭示创伤后应激障碍神经、血液学及行为相关性的动物模型中的生物标志物

本视频展示了从安乐死大鼠中分离脑微血管的过程。包括脑组织的解剖、组织清洗和机械消化，随后通过反复离心以分离出纯净的微血管组分。...

一种从大鼠脑组织中分离神经血管单元的方法

本视频展示了利用寡核苷酸探针检测受5-羟色胺综合征影响的大鼠脑组织中5-羟色胺受体RNA合成的方法。该实验方案包括组织预处理、探针杂交以及酶促检测，以在显微镜下可视化并定量分析5-羟色胺受体RNA的表达水平。...

使用寡核苷酸探针进行原位杂交研究大鼠脑切片中的RNA表达

我们介绍了如何使用激光显微切割技术（LCM），从损伤大鼠脑组织的冷冻切片中分离富集的海马神经元或单个神经元，以用于后续通过定量实时PCR和/或全基因组微阵列进行基因表达分析。...

激光捕获显微切割富集的神经元群体或单个神经元用于创伤性脑损伤后基因表达分析

对特定组织中部分细胞的基因表达进行分析是一项重大挑战。本文介绍了如何通过将快速免疫标记方法与激光显微切割技术相结合，从特定细胞群体中分离高质量的总RNA。...

使用激光捕获显微切割结合快速免疫标记法从特定细胞亚群中分离RNA

本文介绍了一种分离大鼠脑微血管及制备膜样品的方法。该方案具有明显优势，可从单个动物获得蛋白质产量可观且微血管富集度高的样品。所得样品可用于对脑微血管内皮进行可靠的蛋白质分析。...

一种简单且可重复的制备新鲜分离大鼠脑微血管膜样本的方法

我们提供了一种从成年小鼠大脑半球不同解剖区域分离小胶质细胞的方案，随后进行半自动化的文库制备，以实现全长转录组的深度单细胞RNA测序。该方法将有助于阐明小胶质细胞在健康与疾病状态下的功能异质性。...

从单个成年小鼠脑半球分离区域特异性小胶质细胞用于深度单细胞RNA测序

本实验方案描述了利用廉价且常见的工具采集离散的冷冻脑区，以获得高质量蛋白质和RNA的方法。...

用于后续分析的冷冻啮齿类动物脑区采集

本文介绍了一种快速、动手操作的逐步实验方案，用于小鼠脑组织的取出以及从新鲜脑组织中分离特定脑区。在许多神经科学研究实验室中，获取脑区用于分子分析已成为常规操作。这些脑区在分离后立即冷冻，以获得高质量的转录组数据，用于系统水平的分析。...

小鼠脑组织功能区与解剖区域的显微解剖

激光捕获显微切割与微流控反转录定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）相结合，可在单个神经元和胶质细胞中实现转录组检测的解剖学与生物技术特异性。将创新方法与系统生物学策略应用于精神疾病研究，可能推动对疾病机制的理解与治疗手段的发展，例如成瘾中的神经炎症性奖赏缺失假说。...

利用解剖学特异性单细胞基因表达方法研究成瘾行为中反奖赏驱动因素

学习大鼠脑微解剖技术，从特定脑区快速分离嗅球、额叶皮层、纹状体和海马体，用于神经退行性疾病研究。该方法可有效防止RNA和蛋白质降解，确保样本质量。

大鼠脑组织显微解剖用于特定脑区的RNA或蛋白质提取

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