Name: 鞭虫感染muris:在肠道内的2型免疫和炎症模型 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-24T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 5 s
Description: 了解使用Trichuris muris建立肠道寄生虫感染模型的方法，通过口服灌胃感染小鼠并分析Th2免疫反应。该模型有助于研究抗蠕虫免疫机制及肠道炎症病理。

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本研究工作得到了加拿大卫生研究院（项目编号：MSH-95368、MOP-89773 和 MOP-106623，授予 C.Z.）以及加拿大创新基金会的资助。S.C.M. 获得了加拿大卫生研究院/加拿大胃肠病学协会博士后奖学金。C.Z. 是加拿大卫生研究院新研究员。

1. 扩增Trichuris muris虫卵
<ol>
<li>以生成新的批次 Trichuris muris 卵，感染20-30只免疫缺陷小鼠（例如 NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ 
(NSG) 或 129S6/SvEvTac-Rag2tm1Fwa (RAG2-/-)) 或通过口服灌胃法，向6-8周龄遗传易感小鼠（如 AKR/J）接种约300个鼠鞭虫（Trichuris muris）卵。</li> 
<li>32–35 天后，通过 CO 处死小鼠2 窒息</li>
<li>暴露小鼠腹侧，并用70%乙醇润湿腹部。</li>
<li>用镊子夹住腹部皮肤，用剪刀做一小切口。剪开皮肤以暴露腹腔内容物。</li>
<li>识别盲肠和近端大肠，并将其切除。</li>
<li>将盲肠和近端大肠置于含有含500 U/ml青霉素的杜尔贝科改良伊格尔培养基（DMEM）的10 cm培养皿中 500 μg/ml 
链霉素（P/S）。剪开盲肠以暴露其管腔和寄生虫。用镊子将盲肠放入盛有磷酸盐缓冲液（PBS）的烧杯中，轻轻振荡以去除粪便。</li>
<li>将盲肠放回培养皿中，使用光滑弯头镊子（Roboz RS-5047）轻轻取出虫体，并置于含5 ml DMEM + P/S的6孔板的一个孔中。</li>
<li>对所有小鼠重复此过程。</li>
<li>将6孔板放入含湿润纸巾的密封盒中以维持湿度，并在以下条件下孵育： 37°C 4 小时。</li>
<li>4小时后，使用光滑的弯头镊子取出虫体，将其分装至6孔板中的2个新孔，每孔加入5 mL DMEM + P/S。收集原孔中的内容物，转移至15 mL离心管中。以3000 rpm离心，弃去上清液并保留，作为4小时抗原（经PBS透析后可用于细胞再刺激，通常每20只小鼠可获得10–20 mg蛋白质），将含有虫卵的沉淀重悬于高压灭菌的自来水中。</li>
<li>将6孔板放回 37°C 过夜。移除并处理掉蠕虫。将孔中的内容物收集至离心管中，3000 rpm离心5分钟。弃去上清液，保留沉淀作为过夜抗原（可用于后续实验） 毛首鞭形线虫 经PBS透析后进行抗原特异性抗体同种型ELISA检测（通常每20只小鼠可获得10–20 mg蛋白质），并将含有虫卵的沉淀重悬于经高压灭菌的自来水中。</li>
<li>将4小时和过夜的卵合并，并通过滤网过滤卵液 70μm 滤器以去除残留的蠕虫，然后转移至 75 cm2 锥形瓶。将锥形瓶用铝箔包裹，置于暗处，室温（RT）下静置6周。</li>
<li>用高压灭菌的自来水清洗卵，并重悬于含有50个可存活卵的溶液中 50 μl. 为此，将卵在3000 rpm下离心5分钟，并重悬于约50 ml无菌自来水中。去除 50 μl 卵，并置于玻璃载片上。使用40倍放大倍数，计数其中可存活的已孵化卵的数量 50 μl. 将卵稀释至含有50个可存活卵 50 μl有关存活卵子的图像，请参见 Kopper 和 Mansfield 的研究。16.</li>
</ol>
2. 用Trichuris muris虫卵对实验小鼠进行急性感染（每只小鼠200个虫卵）
<ol>
<li>充分重悬虫卵，并取出足够体积的虫卵悬液用于处理所需小鼠数量的两倍（例如，对于 10 只小鼠，取 200 μl × 10 只小鼠 × 2 = 4 ml 虫卵），置于 14 ml 带盖离心管中。</li>
<li>倒置 14 ml 带盖离心管以混匀。用适当规格的喂养针头（对于体重 25 克的小鼠，使用 18 号 1 1/2 英寸针头）连接 1 ml 注射器吸取 200 μl 虫卵悬液。一手固定小鼠颈部皮肤，另一手持注射器通过口服灌胃方式给予虫卵。</li>
<li>等待 21 天。</li>
</ol>
3. 实验收获
<ol>
<li>第21天使用CO2处死小鼠。</li>
<li>用非肝素化注射器通过心脏穿刺采集小鼠血液，并在4°C下保存。次日分离血清并置于-20°C冷冻。血清可用于ELISA法检测抗Trichuris特异性IgG和IgE。</li>
<li>将小鼠腹侧朝上暴露，用70%乙醇润湿腹部。</li>
<li>用镊子夹住腹部皮肤，使用剪刀做一小切口。剪开皮肤及下方膜组织，以暴露腹腔内容物。</li>
<li>辨认小肠、盲肠和结肠。用镊子夹住盲肠并将其拉出腹腔。用另一把镊子将小肠推向右侧，暴露肠系膜淋巴结（mLNs）。小心取出mLNs，避免损伤肠道，放入含有2 ml培养基的15 ml离心管中。如需进行体外处理与再刺激，可将细胞以4×106/ml的密度接种于24孔板（每孔1 ml），加入1 μg/ml αCD3/CD28或50 μg/ml Trichuris抗原刺激72小时，随后通过ELISA和胞内流式细胞术分析细胞因子。</li>
<li>切除盲肠和结肠。</li>
<li>用镊子将远端结肠的粪便颗粒推出，并置于2 ml Axygen离心管中，-20°C冷冻保存。粪便颗粒可通过Western blot检测抵抗素样分子-β（RELM-β）的表达。</li>
<li>取盲肠尖端约0.5 cm。为清除粪便，用镊子夹住盲肠尖端，在培养皿中用3 ml注射器配合22号针头以PBS冲洗。随后将其放入5 ml Falcon螺帽管中，加入新鲜配制的4%多聚甲醛固定液。4°C保存。样品可进行石蜡包埋、切片并贴附于载玻片上，用于组织学分析。</li>
<li>取近端结肠约1 cm用于RNA提取。将样本放入含500 μl RNAlater的2 ml Axygen离心管中，4°C保存。样品可用于qPCR分析mRNA表达水平。</li>
<li>将剩余的盲肠放入标记好的培养皿中，-20°C冷冻保存。</li>
</ol>
4. 盲肠中Trichuris muris虫体的计数
<ol>
<li>从冷冻箱中取出盲肠，放入含有约 5 ml 水的培养皿中。</li>
<li>使用剪刀剪开盲肠，暴露其管腔。</li>
<li>用镊子夹住盲肠，剧烈振荡以去除大部分粪便。</li>
<li>将盲肠转移至另一含有水的培养皿中，用光滑弯头镊子轻轻刮取肠上皮细胞（IECs），使其与下方组织分离。</li>
<li>将盲肠转移至新的含有水的培养皿中，用镊子用力刮擦残留组织，将组织撕成小块。</li>
<li>使用解剖显微镜计数三个培养皿中的所有蠕虫。每发现一条蠕虫，应立即将其从培养皿中移除，以避免重复计数。若蠕虫受损（例如断裂成两半），仅计数较粗或较细的一端，以获得准确数量。</li>
</ol>
5. 代表性结果
Trichuris muris 感染模型可使研究人员定量分析寄生虫负荷和全身性免疫应答，并可通过组织学方法检查盲肠远端的炎症反应。当暴露所获取的盲肠腔时，可使用解剖显微镜对 Trichuris 虫体进行计数（图 1A-B）。针对 Trichuris 的免疫反应参数还包括：在具有抗性的动物中出现抗体同种型向 IgG1 的转换（与 Th2 型免疫相关），而在易感动物中则转换为 IgG2a（与 Th1 型免疫相关）（图 1C）。杯状细胞特异性蛋白抵抗素样分子-β（RELM-β）的表达与清除 Trichuris 相关，可通过 Western 印迹分析检测（图 2）。盲肠远端可用过碘酸-雪夫（Periodic Acid-Schiff, PAS）染色，以评估杯状细胞反应及感染引发的肠道炎症程度（图 3）。
<img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig1.jpg" alt="线虫负荷比较，图表数据分析，线虫显微图像，稀释实验。" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图1"> 图1. 免疫力的定量分析 Trichuris muris. （A）具有抗性的（B6）小鼠排出 Trichuris muris 感染后第21天。相比之下，易感型（AKR/J）小鼠则会发展为慢性感染 毛首鞭形线虫，导致寄生虫定植。每组每根柱状图代表4-8只动物的平均值±标准误。（B）使用解剖显微镜计数虫体。上图显示分离状态下的虫体，下图显示在肠上皮细胞和粪便存在情况下的虫体。（C） 毛首鞭形线虫特异性IgG2a 
通过ELISA测定稀释血清（1:2倍比稀释，起始于1:20稀释度，终止于1:2560稀释度）在包被分泌产物的微孔板上的抗体滴度 毛首鞭形线虫 
抗原（O/N 抗原， 5 μg/ml）。易感的 AKR/J 小鼠具有显著更高的水平 毛首鞭形线虫-特异性血清IgG2a水平低于抗性B6小鼠。
<img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig2.jpg" alt="蛋白质印迹；蛋白表达比较；B6 与 AKR；N 与 Tm 处理；分子生物学" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图 2"> 
图 2. Trichuris muris 的清除与杯状细胞特异性蛋白 RELM-β7 的表达相关。 
通过蛋白质印迹分析，可在感染Trichuris后具有抗性的（B6）小鼠粪便颗粒中检测到RELM-β的产生，但在易感的（AKR/J）小鼠中则无法检测到。 
每条泳道代表单个小鼠样本，(N) = 未处理，(Tm) = 感染Trichuris 21天的小鼠。
<img src="/files/ftp_upload/2774/2774fig3.jpg" alt="B6和AKR小鼠结肠的组织学分析；Trichuris感染前后；显微镜图像" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图3"> 图3. 阑尾远端组织的组织学检查 
随后 毛首鞭形线虫 感染. 5-7 μm 远端盲肠的PAS染色切片。在抗性（B6）小鼠中可见杯状细胞增生和黏液分泌，而在易感（AKR/J）小鼠中则不明显。 毛首鞭形线虫 感染

<ol><li>Cliffe, L. J., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Trichuris+muris+system%3A+a+paradigm+of+resistance+and+susceptibility+to+intestinal+nematode+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Parasitol%22%5BJournal%5D)">The Trichuris muris system: a paradigm of resistance and susceptibility to intestinal nematode infection.</a> Adv. Parasitol. 57, 255-307 (2004).</li>
<li>Else, K. J., Finkelman, F. D., Maliszewski, C. R., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine-mediated+regulation+of+chronic+intestinal+helminth+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Cytokine-mediated regulation of chronic intestinal helminth infection.</a> J. Exp. Med. 179, 347-351 (1994).</li>
<li>Bancroft, A. J., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Th1+and+Th2+cells+and+immunity+to+intestinal+helminths%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Th1 and Th2 cells and immunity to intestinal helminths.</a> Chem. Immunol. 71, 192-208 (1998).</li>
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<li>Khan, W. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+intestinal+muscle+contraction+by+interleukin-9+%28IL-9%29+or+IL-9+neutralization%3A+correlation+with+worm+expulsion+in+murine+nematode+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Modulation of intestinal muscle contraction by interleukin-9 (IL-9) or IL-9 neutralization: correlation with worm expulsion in murine nematode infections.</a> Infect. Immun. 71, 2430-2438 (2003).</li>
<li>Khan, W. I., Blennerhasset, P., Ma, C., Matthaei, K. I., Collins, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stat6+dependent+goblet+cell+hyperplasia+during+intestinal+nematode+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Parasite+Immunol%22%5BJournal%5D)">Stat6 dependent goblet cell hyperplasia during intestinal nematode infection.</a> Parasite Immunol. 23, 39-42 (2001).</li>
<li>Akiho, H., Blennerhassett, P., Deng, Y., Collins, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+IL-4%2C+IL-13%2C+and+STAT6+in+inflammation-induced+hypercontractility+of+murine+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Gastrointest.+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Role of IL-4, IL-13, and STAT6 in inflammation-induced hypercontractility of murine smooth muscle cells.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 282, 226-2232 (2002).</li>
<li>Kopper, J. J., Mansfield, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+improved+methods+for+delivery+of+Trichuris+muris+to+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitol.+Res%22%5BJournal%5D)">Development of improved methods for delivery of Trichuris muris to the laboratory mouse.</a> Parasitol. Res. 107, 1103-1113 (2010).</li>
<li>Bancroft, A. J., Else, K. J., Grencis, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-level+infection+with+Trichuris+muris+significantly+affects+the+polarization+of+the+CD4+response%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Low-level infection with Trichuris muris significantly affects the polarization of the CD4 response.</a> Eur. J. Immunol. 24, 3113-3118 (1994).</li>
</ol>

动物实验严格按照不列颠哥伦比亚大学制定的指南和规定进行。

本方案详细描述了一种标准的高剂量急性Trichuris muris感染模型，可根据研究者的需要进行调整。例如，可在不同时间点处死小鼠并采集组织样本。为确认小鼠是否成功建立完全的蠕虫负荷，可在第14天处死动物，此时所有小鼠的蠕虫负荷应约为200条。亦可将感染持续至32天，此时检测到的所有蠕虫均已成熟，并将在其生命周期内持续存在于宿主体内。此外，本方案还可调整用于建立慢性Trichuris muris感染模型。为此，可将接种的虫卵剂量调整为低剂量感染（约30个虫卵）。在此剂量下，原本具有抗性的小鼠无法诱导保护性Th2反应，反而产生Th1反应，并维持约20条蠕虫的负荷17。
与其它感染模型相比，Trichuris muris 感染模型的一个优势在于，通常情况下感染的小鼠不会出现发病或死亡。然而，研究人员应当注意一些可能影响实验结果的因素。第一个因素是小鼠的遗传背景品系。如结果部分所述，C57BL/6 小鼠具有抗性，而 AKR/J 小鼠易感；同样，其他近交品系也可能表现出不同的感染特征。因此，研究人员必须清楚所用小...

<table><tbody><tr><td>动物喂食针头（18 x 1&amp;frac12;&quot;）</td><td>Popper &amp; Sons, Inc.</td><td>7912</td><td></td></tr><tr><td>平滑弯头镊子</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5047</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>GIBCO, by Life Technologies</td><td>11965</td><td></td></tr><tr><td>NOD.Cg-&lt;em&gt;Prkdc&lt;sup&gt;scid&lt;/sup&gt; Il2r&lt;sup&gt;gtm1Wjl&lt;/sup&gt;/SzJ&lt;/em&gt; (NSG)</td><td>Jackson Laboratory</td><td>005557</td><td>这是我们所使用的小鼠品系，但任何免疫缺陷小鼠或易感品系均应适用。</td></tr><tr><td>RNA later</td><td>Qiagen</td><td>76104</td><td></td></tr><tr><td>2 ml 离心管</td><td>Axygen Scientific</td><td>MCT-200-C</td><td></td></tr><tr><td>15 ml 离心管</td><td>Falcon BD</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>6 孔板</td><td>Falcon BD</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>多聚甲醛</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>&amp;#945;-RELM&amp;#946; 抗体</td><td>PeproTech Inc</td><td>0694270Rb</td><td></td></tr></tbody></table>

trichuris muris 感染：肠道2型免疫与炎症的一个模型

Trichuris muris Infection: A Model of Type 2 Immunity and Inflammation in the Gut

Trichuris muris 是小鼠的一种天然病原体，在生物学和抗原性上与感染人类和家畜的Trichuris物种相似1。通过口服灌胃给予感染性虫卵，虫卵在远端小肠孵化，侵入盲肠和近端结肠隐窝上皮排列的肠上皮细胞（IECs），成熟后成虫将虫卵释放到环境中1。该模型是研究调控CD4+辅助性T细胞（Th）活化因素以及肠道上皮变化的有力工具。在具有抗性的近交系小鼠（如C57BL/6和BALB/c）中，免疫反应以Th2极化细胞因子（IL-4、IL-5和IL-13）为特征，并伴随虫体排出；而在遗传易感的AKR/J小鼠中，Th1相关细胞因子（IL-12、IL-18、IFN-γ）则促进慢性感染的发生2-6。Th2细胞因子可诱导肠道微环境发生一系列生理变化，包括肠上皮细胞快速更新、杯状细胞分化、细胞募集以及上皮通透性和平滑肌收缩性的改变，这些变化均被认为参与了虫体的排出过程7-15。本文详细描述了一种用于扩增Trichuris muris虫卵的实验方案，可用于后续研究。同时提供了一个示例性的实验收获流程及感染后分析建议。总体而言，本方案将为研究人员提供开展Trichuris muris小鼠感染模型所需的基本技术手段，可用于探究胃肠道中Th细胞的分化倾向以及肠上皮细胞的免疫效应功能。

鼠鞭虫（Trichuris muris）感染是一种肠道Th2免疫模型，其中具有抗性的小鼠会产生保护性的Th2反应，而易感小鼠则会产生病理性Th1反应。

Trichuris muris 感染：肠道2型免疫与炎症的一个模型

Trichuris muris 是小鼠的一种天然病原体，在生物学和抗原性上与感染人类和家畜的毛首线虫属（Trichuris）物种相似1。

本实验的总体目标是建立并维持一种自然的肝片吸虫感染模型。首先，通过口服灌胃法使小鼠感染肝片吸虫卵。21天后，处死感染动物，采集血液、肠系膜淋巴结、粪便颗粒、结肠和肝脏组织。利用这些样本，可分析针对TRICKS的免疫应答。可使用镜像分析血清样本，并通过溶血素检测TRAs特异性抗体。体外重刺激淋巴结细胞可用于分析细胞免疫反应。可使用Western印迹法检测粪便颗粒中的蛋白质含量，并通过结肠的QPCR分析进行基因表达分析。最后，盲肠尖端可用于组织学检查，而其余部分可用于测定感染小鼠的寄生虫负荷。最终可以获得结果，以判断小鼠对弓形虫（Trails MOUs）感染是否具有抗性或易感性，并可对针对该寄生虫的免疫应答进行表征。该方法有助于回答免疫学领域的关键问题，例如哪些因素调控辅助性T细胞的活化，以及哪些蛋白质是TH2细胞分化所必需的。弓形虫（Trauss MOUs）卵囊可在免疫缺陷小鼠或遗传易感品系（如KR品系）中增殖，感染后35天可通过安乐死小鼠收集卵囊。暴露动物的腹侧表面，使用无菌镊子和剪刀以乙醇冲洗小鼠腹部。抓住腹部皮肤并做一个小切口。暴露腹腔内容物，识别盲肠和近端结肠，然后将其切除。将器官转移至含有青霉素和链霉素的补充DMEM的10厘米培养皿中。然后用镊子剪开盲肠和近端结肠，暴露肠腔和虫体。将打开的器官放入含有PBS的烧杯中，轻轻振荡以洗去粪便。清洗盲肠后，将其转移至新的培养皿中，使用光滑的弯头镊子轻轻取出寄生虫。将每只小鼠体内的所有寄生虫转移至六孔板的一个孔中，该孔内含有5毫升添加抗生素的DMEM培养基。将六孔板连同湿润的纸巾一起放入密封容器内，于37°C孵育4小时，使寄生虫产卵。孵育结束后，用镊子将线虫从原始孔中取出，并分装到两个含有DMEM的新孔中。以这种方式分装线虫可最大限度地利用移液器回收虫卵。收集原始孔中剩余的含有分泌抗原和虫卵的培养基，并转移至15毫升Falcon管中。将离心管在3000 RPM下离心五分钟。然后移除并保存上清液，其中含有四小时抗原，将含有沉淀的试管用无菌水重悬。再次将含有线虫的六孔板置于37°C，孵育过夜，次日早晨进行后续操作。弃去线虫后，收集孔中的内容物（如前所示），离心上清液以分离虫卵。保留含有过夜抗原的上清液，并将虫卵重悬于水中。与之前相同，将这些虫卵与四小时孵育获得的虫卵合并。用70微米的滤网过滤虫卵，以去除残留的线虫。然后将虫卵转移至75平方厘米的锥形瓶中。用铝箔包裹锥形瓶以避光，并在室温下储存六周。这将使卵在六周后成熟并孵化。清洗卵，搅拌水，并计数可存活的卵。如图所示。以具有活力的孵化卵和无活力的卵为例，Reese's 采用 50 每 50 微升的 Exeter 浓度。此时，卵可在感染小鼠前于 4°C 下保存。务必充分重悬含有卵的溶液。将所需量的接种物转移至一个14毫升带卡扣盖的试管中，并颠倒试管以混匀。用适合动物体

trichuris-muris-infection-model-type-2-immunity-inflammation

Research

科研

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学与感染

鞭虫感染muris：在肠道内的2型免疫和炎症模型

炎症性肠病的实验模型使我们能够研究与发病机制相关的复杂先天性和适应性免疫反应。通过组织学评分、促炎细胞因子的定量分析以及髓过氧化物酶活性的检测，可以开始评估炎症性肠病中所见的这些免疫反应。...

研究DSS诱导的IBD模型中的肠道炎症

术后肠梗阻（POI）是腹部手术后的一种并发症，可导致发病率升高和住院时间延长。由于目前缺乏有效的预防或治疗策略，亟需加强相关研究。因此，我们建立了一种标准化且可行的小鼠模型，用于研究POI的病理生理机制，并探索潜在的治疗方案。...

肠道运动功能及肠壁炎症在啮齿类动物中的功能评估：标准化肠道操作模型中的分析

Citrobacter rodentium 小鼠模型：研究病原体与宿主在感染性结肠炎中的作用

动物模型在阐明宿主和病原体特异性机制以促进慢性炎症发展方面已被证明是不可或缺的工具。本文描述了一种利用人类病原体牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas...

一种用于研究病原体诱导局部及全身慢性炎症的小鼠模型

本文介绍了一种通过将同基因型CD4+CD45RBhigh...

通过将效应性CD4+CD45RBhigh T细胞过继转移至免疫缺陷小鼠诱导小鼠肠道炎症

在此抗原驱动的结肠炎模型中，表达红色荧光蛋白的OT-II CD4+ T细胞被过继转移至单核吞噬细胞（MPs）表达绿色荧光蛋白的RAG-/-小鼠体内。随后，用表达卵清蛋白（OVA）与青色荧光蛋白（CFP）融合蛋白的大肠杆菌（Escherichia...

开发一种抗原驱动的结肠炎模型以研究抗原呈递细胞向T细胞呈递抗原的过程

本文介绍了一种模拟肠道屏障受损后细菌来源化合物进入机体的实验方案。向小鼠全身注射低剂量的亚致死浓度脂多糖，并在注射后连续监测24小时。在多个时间点检测脾脏、肝脏和结肠中促炎性细胞因子的表达水平。...

向小鼠注射脂多糖以模拟肠道屏障受损后微生物来源产物的进入

小鼠远端结肠造口术为人类分流性结肠炎提供了一种小鼠模型，该模型表现为粪流绕行的结肠节段中以淋巴细胞性为主的结肠炎。...

小鼠远端结肠造口术：C57BL/6 小鼠分流性结肠炎的新模型

本方案描述了一种由沙门氏菌（Salmonella）诱导的小鼠肠道纤维化模型，该模型具有类似于克罗恩病的关键病理特征，包括透壁性炎症和纤维化。该方法可用于利用维持在C57Bl/6遗传背景上的基因突变小鼠，评估影响纤维化结局的宿主因素。...

慢性沙门氏菌感染诱导的肠道纤维化

本方案描述了一种针对肠道微生物群抗原特异性T细胞的过继转移结肠炎模型。从CBir1 TCR转基因小鼠中分离CD4+...

通过将CBir1 TCR转基因CD4+ T细胞过继转移至免疫缺陷小鼠诱导肠道炎症

我们的详细方案概述了先进的肠芯片模型的构建与使用方法，该模型可模拟具有三维结构和多种细胞类型的肠黏膜，从而能够深入分析微生物定植引发的免疫反应和细胞功能。...

用于分析肠道黏膜免疫反应的免疫健全肠芯片模型

了解使用Trichuris muris建立肠道寄生虫感染模型的方法，通过口服灌胃感染小鼠并分析Th2免疫反应。该模型有助于研究抗蠕虫免疫机制及肠道炎症病理。

Trichuris muris 感染：肠道2型免疫与炎症的一个模型

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