一种从抗原特异性B细胞生成单克隆抗体的技术

获取真核表达载体，这些载体编码从抗原特异性B细胞克隆得到的抗体重链或抗体轻链。

介绍聚乙烯亚胺（polyethylenimine），一种阳离子聚合物，可通过静电作用与带负电荷的载体结合，形成聚复合物（polyplexes）。

将多聚复合物与哺乳动物细胞共同孵育，使其黏附于细胞并被内化 通过 内吞作用。形成的内体与溶酶体融合。

多聚物在多聚体复合物中引起囊泡的渗透性肿胀，导致其破裂并释放载体。 

释放的载体进入细胞核，并转录为重链和轻链mRNA，随后进行翻译 通过 内质网上的核糖体

生成的肽链组装成抗体，随后被转运至高尔基体，并包装到分泌囊泡中。

当分泌囊泡与细胞膜融合后，抗体会被释放到细胞外。

收集含有抗体的上清液用于后续检测。

转染前一天，在96孔平底培养板的每个孔中接种15,000个人类胚胎肾细胞，每孔加入200微升添加了10%胎牛血清的杜氏改良伊格尔培养基。随后，将培养板置于37摄氏度、5%二氧化碳条件下过夜孵育。使用线性聚乙烯亚胺衍生物转染试剂对细胞进行共转染。将0.5微升DNA转染试剂用10微升150毫摩尔氯化钠溶液稀释。

接下来，将每种表达不同重链和轻链的载体各0.125微克溶于10微升150毫摩尔氯化钠溶液中。每种稀释液均涡旋振荡10秒。然后，将先前稀释的DNA转染试剂与10微升DNA溶液混合。迅速涡旋振荡DNA转染混合物15秒，并在室温下孵育15分钟。

将DNA转染混合物逐滴加入细胞中，然后轻轻摇动培养板。转染后16小时更换培养基，并在37摄氏度的无血清培养基中继续培养细胞五天。