对流增强递送抗体至小鼠脑部

将已进行颅骨正中切口的麻醉小鼠固定于立体定位仪上。

检测颅骨上的参考点前囟（bregma），并确定注射位置。

在指定位置钻孔，避免损伤覆盖大脑的硬脑膜。

取一根已装载抗体、安装在立体定位机器人上并与输注泵连接的步进导管。

导管由一根从金属针中伸出的熔融石英毛细管组成，在熔接处形成阶梯状的外径。

将导管插入脑实质。启动输注泵，在导管开口处形成压力梯度，并以可控速率输送抗体，该技术称为对流增强递送。

阶梯状直径压缩组织，形成密封。

密封件可防止液体回流，并能在降低组织损伤风险的同时实现大体积抗体的分布。

向小鼠纹状体注射抗体时，需确认麻醉小鼠对皮肤夹捏无反应，使用毛发修剪器剃除头部毛发，并用浸有碘溶液的棉签对皮肤进行消毒。

使用手术刀沿颅骨中线做一道10毫米的皮肤切口，至眼睛水平处结束。使用鼻夹和耳杆将小鼠固定在立体定位仪框架上，注意确保颅骨表面水平并牢固固定。

将注射器放入立体定位机器人中，并在参考点处使钻头与导管尖端对齐。使用镊子牵拉皮肤，定位颅骨表面的前囟。在软件中使用钻头尖端以前囟为参考点，并将钻头移至前囟位置前方1毫米、侧方2毫米处。

钻孔形成骨窗，注意不要损伤硬脑膜，然后将注射器移至骨窗上方。从注射器中推出 0.5 至 1 微升液体，以确保导管内无残留气泡。按照演示开始对流增强给药，并观察颅骨表面是否有液体从注射部位反流的痕迹。

在递送结束并拔除导管后，以每分钟 0.2 µL 的速度启动注射泵，以检查注射过程中是否存在导管堵塞。若无堵塞发生，应立即观察到注射混合液的液滴从导管尖端渗出。