利用荧光介导断层成像评估小鼠肠道炎症

让一只笼养小鼠饮用含有合成硫酸化多糖的饮水，该多糖可诱导结肠炎，即一种炎症性肠病。

这种多糖进入肠腔并破坏上皮屏障，使共生微生物得以侵入组织，从而引发炎症。

单核细胞浸润组织并分化为巨噬细胞。

将荧光染料偶联的抗体通过静脉注射到小鼠尾部。

抗体到达结肠并与巨噬细胞上的目标糖蛋白结合，从而标记这些细胞。

麻醉小鼠。剃除腹部毛发，以尽量减少成像过程中光线的反射和吸收。

将小鼠放入检查盒中，并插入荧光介导断层扫描仪或 FMT 扫描仪。

激发后，荧光团会发射荧光。采集荧光反射图像，以重建显示荧光团空间分布的三维图谱。

荧光强度升高表明巨噬细胞浸润增加。

为诱导结肠炎，将2克葡聚糖硫酸钠（DSS）溶解于100毫升经高压灭菌的饮水中，按每只小鼠每天约5毫升的饮水量，供给实验小鼠自由饮用。在扫描前24小时，将感兴趣的抗体混合物装入避光的无菌注射器中，通过尾静脉将抗体静脉注射至实验动物体内。

在实验当天，使用电动剃须刀剃除实验动物腹部区域的毛发，以尽量减少光的反射和吸收。使用具有确定厚度和吸收特性的组织模拟体模，将感兴趣抗体溶液的特定体积注入体模中，并在FMT设备上测量荧光信号。

然后，在用于小型动物的兽医荧光介导断层成像（FMT）设备上，点击 新建研究，并在研究描述中包含相关示踪剂，包括成像参数和剂量。根据实验设计创建研究分组，并为每组配备适当数量的动物。

当系统已完成示踪剂构建体的校准后，将第一只麻醉小鼠以仰卧位放入可加热至42摄氏度的检查盒中。将检查盒插入成像系统，并从相应的实验组中选择合适的样本。选择已给予的示踪剂，以确保示踪剂浓度值被准确计算，并在适当的波长下采集荧光反射图像用于扫描。

单击获取图像以勾勒扫描区域，并确认扫描区域作为叠加显示在荧光反射图像上。调整扫描区域，使其包围目标区域，注意避免包含空气或残留毛发的区域。

根据成像目标，选择扫描视野分辨率以设定扫描视野内的图像数据点数量。然后点击扫描，开始在选定波长下进行图像采集。扫描结束后，将动物从载物盒中取出，在返回笼具前对其进行监测直至完全恢复。可根据实验设计在不同时间点重复进行FMT成像。