0 次观看 • 4:06 分钟 • July 8th, 2025
让一只笼养小鼠饮用含有合成硫酸化多糖的饮水,该多糖可诱导结肠炎,即一种炎症性肠病。
这种多糖进入肠腔并破坏上皮屏障,使共生微生物得以侵入组织,从而引发炎症。
单核细胞浸润组织并分化为巨噬细胞。
将荧光染料偶联的抗体通过静脉注射到小鼠尾部。
抗体到达结肠并与巨噬细胞上的目标糖蛋白结合,从而标记这些细胞。
麻醉小鼠。剃除腹部毛发,以尽量减少成像过程中光线的反射和吸收。
将小鼠放入检查盒中,并插入荧光介导断层扫描仪或 FMT 扫描仪。
激发后,荧光团会发射荧光。采集荧光反射图像,以重建显示荧光团空间分布的三维图谱。
荧光强度升高表明巨噬细胞浸润增加。
为诱导结肠炎,将2克葡聚糖硫酸钠(DSS)溶解于100毫升经高压灭菌的饮水中,按每只小鼠每天约5毫升的饮水量,供给实验小鼠自由饮用。在扫描前24小时,将感兴趣的抗体混合物装入避光的无菌注射器中,通过尾静脉将抗体静脉注射至实验动物体内。
在实验当天,使用电动剃须刀剃除实验动物腹部区域的毛发,以尽量减少光的反射和吸收。使用具有确定厚度和吸收特性的组织模拟体模,将感兴趣抗体溶液的特定体积注入体模中,并在FMT设备上测量荧光信号。
然后,在用于小型动物的兽医荧光介导断层成像(FMT)设备上,点击 新建研究,并在研究描述中包含相关示踪剂,包括成像参数和剂量。根据实验设计创建研究分组,并为每组配备适当数量的动物。
当系统已完成示踪剂构建体的校准后,将第一只麻醉小鼠以仰卧位放入可加热至42摄氏度的检查盒中。将检查盒插入成像系统,并从相应的实验组中选择合适的样本。选择已给予的示踪剂,以确保示踪剂浓度值被准确计算,并在适当的波长下采集荧光反射图像用于扫描。
单击获取图像以勾勒扫描区域,并确认扫描区域作为叠加显示在荧光反射图像上。调整扫描区域,使其包围目标区域,注意避免包含空气或残留毛发的区域。
根据成像目标,选择扫描视野分辨率以设定扫描视野内的图像数据点数量。然后点击扫描,开始在选定波长下进行图像采集。扫描结束后,将动物从载物盒中取出,在返回笼具前对其进行监测直至完全恢复。可根据实验设计在不同时间点重复进行FMT成像。
本研究通过使用合成硫酸化多糖诱导小鼠结肠炎,并利用荧光介导断层成像技术(FMT)检测巨噬细胞的浸润情况。该方法包括给予右旋糖酐硫酸钠以及使用荧光染料标记的抗体来可视化结肠中的巨噬细胞。
荧光介导断层成像(FMT)可实现对小鼠模型中巨噬细胞驱动的肠道炎症进行无创、定量评估,有助于炎症性肠病研究中的早期靶点验证。该成像流程可提供免疫细胞浸润的空间分布和强度数据,为机制性风险排除和临床前发现阶段的预测信心提供依据。将FMT整合到发现流程中,可增强免疫学聚焦项目的转化连续性及产品组合决策能力。
基于FMT的成像技术融入了从发现到临床前研究的连续过程,架起了早期机制研究与炎症性疾病模型中转化生物标志物验证之间的桥梁。
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最后更新:29 八月 2026