使用电容式免疫探针生物传感器进行靶肽检测和测量

从组装的带有聚多巴胺层的全氟烷氧基涂层铂线开始。

该探针浸泡在含有靶肽特异性抗体的溶液中，该抗体固定在聚多巴胺上，形成免疫探针。

清洗免疫探针并将其放入带有氯化银接地电极的流动室中，建立电路。

首先，引入缓冲液并施加电压以激活免疫探针，使其能够充当电池或电容器，将能量存储为电荷。

记录电信号以生成基线。

现在，将生物传感器暴露于含有目标肽的溶液中。

这些肽与探针上的抗体结合，导致局部电荷和生物传感器中存储的能量发生变化。

记录电信号。信号的增加表明目标肽的存在，而该信号的大小与目标肽浓度相关。

首先，剪下25厘米长的全氟烷氧基涂层铂线。然后，使用手术刀从一端剥去大约 5 毫米的全氟烷氧基涂层，注意不要切入铂线。现在，将铂线的剥离端插入镀金的 1 毫米公连接器引脚中。然后，使用针钳将连接器引脚齿压接在铂线剥离端周围，并将铂线焊接到镀金连接器引脚上。

接下来，将50毫克盐酸多巴胺加入50毫升10毫摩尔PBS中，pH值为6，并搅拌混合，制备多巴胺溶液。完全溶解多巴胺后，将铂线的尖端放入装有新鲜制成的补充多巴胺的PBS的容器中。将氯化银盘电极连接到头部载物台的接地通道。然后，将氯化银盘放入含有补充多巴胺的PBS和铂丝的容器中。

在继续之前，将分流线连接到头台的参考通道 stage 。打开交互式数据采集软件，通过将起始电位设置为负0.6伏，结束电位设置为0.65伏，扫描速率设置为0.04伏/秒，沉积持续时间设置为420秒，设置锯齿电沉积命令电位协议。

完成聚多巴胺沉积后，从容器中取出氯化银研磨颗粒和铂线尖端。将线尖放入含有 pH 7.4 PBS 的微管中 2 至 5 分钟，并确保线尖不接触微管的侧面或底部。然后，通过将目标抗体与pH 7.4的PBS以1比20的比例在适当大小的容器中混合来制备抗体溶液。

接下来，将铂电极的聚多巴胺沉积尖端在室温下浸泡在抗体溶液中两小时，确保铂线尖端悬浮在溶液中，不停留在微管的内表面上。将电容式免疫探针的功能尖端放入流动室中，注意不要以任何方式干扰电极的尖端，因为这样做可能会损坏探针的感觉尖端。

第一次实验测试之前，执行TBS标准运行以调节电容式免疫探针，对于电压协议，将正阶跃电位设置为110毫伏，将负阶跃电位设置为负5毫伏，步进持续时间为20毫秒，采集持续时间为600秒。

接下来，使用相同的TBS创建感兴趣的肽溶液。为了保持超熔合物的组成，请建立一个歧管系统，其中超熔合物可以在 TBS 和补充肽的 TBS 之间切换。使用 TBS 标准参数，并通过将采集持续时间设置为 360 秒来设置肽传感数据采集协议。