小鼠冠状动脉结扎术的改良技术

本实验的总体目标是在小鼠体内建立心肌梗死模型。首先沿腋中线做皮肤切口，随后通过第三与第四肋间左侧开胸术暴露心脏。

然后在左前降支动脉的近端进行结扎。最后关闭胸腔，将小鼠放回笼中使其自然恢复。最终可通过心电图或超声心动图来评估心肌梗死情况。

该方法的可视化演示至关重要，因为靠近左侧结扎冠状动脉的操作较难掌握。通过将结扎位置置于左侧开口稍下方，可确保充分的心肌梗死。但需注意避免穿刺左心耳，否则可能导致致命性出血。

手术开始时，通过吸入2%至5%的异氟烷对一只六周龄或更年长的小鼠进行麻醉。通过夹捏脚趾以确认动物已充分麻醉。待小鼠完全镇静后，将其转移至手术区域并放置于手术台上。

将其背部置于加热垫上。为维持37摄氏度的恒定体温，使用内径为0.2厘米的管路和含2%异氟烷的空气混合气体，通过异氟烷雾化室将小鼠固定在插管装置上。将导管插入小鼠的气管中。

剃除小鼠左侧心前区胸部的毛发，然后用碘伏消毒该区域，再用75%乙醇重复擦拭三次。同时使用无菌镊子将眼用软膏涂抹于小鼠眼睛表面。

沿腋中线做1.5厘米切口。该入路有助于后续进行超声心动图评估。由于这些小鼠年龄较小，使用剪刀而非手术刀，以避免损伤下方组织。

然后使用钝头血管镊，将胸壁上的胸骨前肌分离并牵开。在第三和第四肋之间行左侧开胸术，以暴露心脏前表面和左肺。进一步使用合适的眼睑拉钩牵开胸壁。

为了更好地使用牙科镊子和钝头剪刀进行观察和操作，需去除心包膜。接着，准备一根7-0号丝线及缝合针，用于动脉结扎。将缝合针穿过左冠状动脉下方，并在结扎线与动脉之间保留一层心肌组织，以完成左冠状动脉的结扎。

通过在第三和第四肋骨上各缝合一针来关闭胸腔。将异氟烷浓度降低至0.5%，并使用5-0的聚乙二醇酸缝线以三针缝合皮肤。术后镇痛给予每千克体重0.05毫克的丁丙诺啡腹腔注射。

最后，将小鼠放入温暖的笼子中使其自发恢复，并在饮水中提供每毫升0.6毫克的丁丙诺啡。术后24小时内需密切监测小鼠，以评估心肌梗死的影响。最佳的侵入性方法是在术后数天通过超声心动图评估心脏功能。

采用本方案，结扎左冠状动脉可诱导心肌缺血，累及约40%的左心室。这会导致心电图ST段发生显著改变，如以下代表性心电图所示，分别为结扎前和结扎后记录。心肌梗死前。

心电图记录的QRS波群较窄且持续时间短。心肌梗死后，明显的ST段抬高与QRS波群融合，使QRS波群比心肌梗死前记录的更宽、更高。为研究心肌梗死的影响，应在心肌梗死手术后数天通过超声心动图评估心脏功能。

此处显示的是来自假手术小鼠的超声心动图记录。与假手术小鼠中观察到的良好心肌收缩相比，在心肌梗死小鼠中。

心肌梗死（mi）后72小时，在收缩期可见左心室游离壁明显无运动。观看本视频后，您应充分理解该心肌梗死小鼠模型，并能够在您自己的实验室中成功建立该模型。