在多电极阵列上培养小鼠螺旋神经节神经元外植体

从包含螺旋神经节和柯蒂氏器的小鼠内耳节段开始，这两者均为内耳的特化结构。

耳蜗中的柯蒂氏器含有毛细胞，这些毛细胞作为听觉信号的感受器。

螺旋神经节由神经元胞体组成，这些胞体发出突起以支配柯蒂氏器的毛细胞。

将螺旋神经节与科尔蒂器官分离，并从中获取小块组织切片或外植体。

现在，取一个包被有细胞外基质并含有培养基的多电极阵列。

将外植体放置在阵列上，并使耳蜗柯蒂氏器位于电极区域之外。孵育。

外植体附着于包被的多电极表面。

定期添加含有血清蛋白和生长因子的培养基。

在培养过程中，培养基成分和柯蒂氏器提供神经营养支持，促进螺旋神经节神经元的神经突在多电极阵列表面生长。

用镊子夹住螺旋神经节的基部和耳蜗柯蒂氏器，将柯蒂氏器从蜗轴中的螺旋神经节分离，缓慢地从基部向顶端松解柯蒂氏器。随后，使用镊子或精细的显微解剖剪刀或刀片，将外侧的组织块从螺旋神经节上切下。

现在，将螺旋神经节外植体和耳蜗器官转移到微电极阵列（MEA）上。然后，将螺旋神经节外植体放置在电极区域上方，耳蜗器官则放置在距离电极区域约5毫米的位置。在放置外植体和耳蜗器官时，应避免对组织造成损伤。之后，小心地将微电极阵列放入培养箱中，在37摄氏度和5% CO₂条件下进行培养。

第二天，目视检查外植体是否已附着于多电极阵列（MEAs）上。随后，在连续五天内每天添加含有10%胎牛血清（FBS）和脑源性神经营养因子（BDNF）的100微升培养基。第6天时，加入2毫升含有10% FBS和5纳克/毫升BDNF的培养基，继续培养组织额外13天。