准备楔形脑切片以可视化听觉神经元

小鼠大脑开始，在后部下方水平解剖，以保留对声音处理至关重要的听觉神经元。

后部安装在磁盘上。放置琼脂块以在切片过程中稳定组织。

将该部分转移到配备刀片的振动切片机切片室的阶段。

引入冷缓冲液和气泡碳原气体，提供氧气并保持神经元完整性。

进行均匀的水平切割以去除大脑部分的上部。

然后，倾斜载物台并继续切割剩余部分，直到看到听觉神经根。

重新调整舞台。接下来，旋转它并调整刀片位置以获得切片薄边的所需厚度。

刀片移开并将载物台重新对齐到其先前的位置。现在，将大脑切成楔形，一侧较厚，另一侧较薄。

较厚的一侧包括听觉神经根，而较薄的一侧则具有相互连接的听觉神经元。

首先使用剃须刀片从鼻子到颈后切开头骨中线的皮肤。剥开皮肤露出头骨，从头骨底部开始，一直向鼻子方向，用小剪刀通过中线在头骨上切开一个切口。

lambda缝合处，从中线横向两侧耳朵在颅骨上切开切口，剥离颅骨，露出大脑。从喙端开始，使用小实验室抹刀轻轻地将大脑从颅骨中抬起，以切断视神经。

继续轻轻地向后工作大脑，露出腹面，用细镊子小心地捏住脑干腹面附近的三叉神经进行切割。将制剂放入装有冷切片溶液的玻璃培养皿中，并将培养皿置于解剖显微镜下。修剪靠近脑干的面神经，露出前庭耳蜗神经。

使用细镊子将尖端推入前庭耳蜗神经尽可能离开颅骨的孔中。捏断两侧神经，使神经根附着在脑干上。

梯形体附近的脑干腹侧表面去除脑膜和脉管系统。然后，捏住剩余的颅神经和结缔组织，使大脑完全从头骨中解放出来，如果可能的话，注意保留剩余的脊髓。

要准备将大脑表面固定到舞台上，请将大脑腹侧朝上放置，并使用钝器轻轻固定脊髓以稳定脑组织。将打开的镊子以大约 20 度角穿过大脑插入培养皿底部，使尖端从大脑尾部的背表面离开视交叉，然后使用剃须刀片沿着镊子切割。

接下来，准备一立方厘米的 4% 琼脂块，并在舞台上将一小滴胶水涂抹成一个矩形。使用镊子小心地提起大脑，然后用纸巾的边缘轻轻擦拭多余的液体。然后，将堵塞的表面放在胶水上，使切片时腹面朝向刀片的方向，并将琼脂块轻轻推到背面作为支撑。

要获得楔形切片，耳蜗神经根在厚侧，梯形体的内侧、橄榄耳蜗神经元和内侧核位于薄侧，将带有连接大脑的磁盘放在载物台支架上，并将支架放置在振动切片机的切片室中，大脑的腹侧表面朝向刀片。用冰冷的切片溶液填充腔室，并将刀片放入碳原气泡溶液中。

感兴趣区域的尾部切片，以确保切片对称。然后，将载物台向一侧移动约 15 度。继续小心切片，直到听觉神经根一侧靠近表面，切片另一侧表面可以看到面神经。

载物台移回原位置 15 度，然后将刀片移离组织。将载物台底座旋转 90 度，使薄侧的侧边缘朝向刀片，然后将刀片降低数百微米，然后慢慢将刀片靠近组织边缘。在刀片稍微缩回的情况下，将刀片降低到切片薄边的所需厚度。

刀片从组织上移回并向后旋转载物台底座，使腹侧表面面向载物台底座。切开以指定楔形切片的喙面，并将切片转移到一张一平方厘米的界面纸上。尾面朝下。

面神经在喙侧切片的两个半球上都应该可见。然后，将切片移至 35 摄氏度的培养室中恢复 30 分钟。