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神经科学
0 次观看 • 3:06 分钟 • July 8th, 2025
首先将神经元细胞加入培养皿中的适宜培养基中。
加入含有磁性核心并标记有荧光染料的荧光磁性纳米颗粒（MNPs）。
孵育期间，细胞通过内吞作用摄取磁性纳米颗粒（MNP）并被磁化。
将一块洁净的磁化图案基底放入培养皿中。该玻璃基底具有带磁性的嵌入式几何图案。
通过暴露于紫外光下对培养基进行灭菌。
用胶原蛋白包被基质以促进细胞贴附。
将载有磁性纳米颗粒的细胞加入底物中并孵育。
基底的外加磁场吸引载有磁性纳米颗粒的细胞，使其得以附着。
定期加入含有特定生长因子的培养基。
生长因子有助于细胞形成突起，而基底的磁性图案则引导这些突起的取向。
在普通的未包被35毫米培养皿中接种100万细胞。向培养皿中加入计算体积的磁性纳米颗粒（MNP）悬浮液和分化培养基，以达到所需的MNP浓度。混匀细胞、MNP和分化培养基，然后将培养皿置于37摄氏度、5%二氧化碳的湿润培养箱中孵育24小时。
用70%乙醇清洁图案化基底，并将其放入生物安全柜中的35毫米培养皿内。将一块大磁铁置于图案化基底下方持续1分钟，然后通过将培养皿向上移开并取出磁铁，将其移出生物安全柜。打开紫外灯照射15分钟。
为制备胶原包被的玻璃基底，将I型胶原以1:50的比例溶于30%乙醇中。用该溶液覆盖玻璃表面，将培养皿置于通风橱中静置4小时，直至溶液完全蒸发。随后用无菌PBS洗涤三次。从培养箱中取出细胞，将细胞悬液在200 g 条件下离心5分钟，并弃去上清液。用1毫升新鲜分化培养基重悬细胞，并使用血细胞计数板对细胞进行计数。
在35毫米培养皿的基质上接种105个细胞，并加入2毫升分化培养基。将培养物置于37摄氏度、含5%二氧化碳的湿化培养箱中孵育。24小时后，向细胞中加入1至100新鲜的小鼠β-NGF。每两天更换一次分化培养基，并添加新鲜的β-NGF。