生成星形胶质细胞和神经元的 3D 共培养球体以诱导突触形成

0 views • 2:26 min • July 8th, 2025

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取涂有表面活性剂的多孔板,以降低孔的表面张力。

合适的培养基中加入所需比例的星形胶质细胞和神经元。

心以沉淀细胞,然后孵育。

低表面张力可防止细胞粘附在孔表面,导致它们聚集。

细胞通过各种膜相互作用(包括粘附分子)相互粘附,形成 3D 共培养球。

收集球体并将它们转移到管子中。

让球体沉淀下来。除去上清液并加入新鲜培养基。

将球体转移到含有合适生长培养基的旋转瓶中,并在不断旋转的情况下孵育。

在球体中,神经元相互延伸投射,形成称为突触的连接处,而星形胶质细胞向突触延伸,与神经元建立密切联系。

所需比例的解离 hAstros 和 hNeurons 或 iNeurons 以总体积为 2 毫升添加到微孔板的每个孔中。将板以100倍g离心三分钟,然后返回培养箱两天。

一天后,板中应该形成密集的微球。使用 1,000 微升微量移液器轻轻地从微孔中取出球体。用介质轻轻用力到微孔的底部,以去除任何额外的粘附球体。

所有球体收集在 15 毫升锥形管中后,让其沉淀。然后,首先吸出旧培养基,然后加入至少两毫升新鲜培养基来清洗球体。将球体加入装有 50 至 60 毫升培养基的旋转烧瓶中。将烧瓶放入培养箱中,放在设置为 60 RPM 的磁力搅拌板上。突触形成至少需要三周的培养时间。

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Last updated: 4 July 2026