利用冷大气等离子体处理促进神经干细胞分化

从在经细胞外基质包被的盖玻片上培养于适当分化培养基中的神经干细胞开始。

取一支含有冷等离子体的注射器，冷等离子体是一种物质状态，包含多种活性成分，如紫外线辐射和带电粒子。

将等离子体注射器的喷嘴置于神经细胞培养物上方的特定高度。

启动等离子体射流。

血浆与神经干细胞相互作用，激活这些细胞。

移除旧的培养基，加入新鲜培养基并进行孵育。

随着时间推移，激活的神经干细胞产生突起。

弃去培养基。

在倒置相差显微镜下，若观察到细胞表面存在细长突起，形似神经细胞的突起，则表明细胞已发生分化。

为对神经干细胞进行等离子体处理，将注射器喷嘴与细胞培养板第一孔的距离设置为15毫米。将神经干细胞培养物中的上清液更换为800微升新鲜分化培养基，然后将培养板置于等离子体射流下。

确保移液枪喷嘴固定在每个孔的中央，在每个处理组中分别用血浆处理三个孔，每孔处理60秒，另用1%氦气和氧气混合气体处理三个孔，每孔处理60秒，剩余三个孔不作处理作为对照。随后，将上清液更换为1毫升新鲜分化培养基，并将细胞放回培养箱中继续培养6天。每天在倒置相差显微镜下观察各组细胞的分化状态。

处理后，将细胞在条件培养基中充分平衡约1小时，然后用新鲜的分化培养基更换上清液。