脊髓神经前体细胞向运动神经元的分化

从一个涂有合成聚合物和黏附蛋白的培养板开始。 

加入悬浮于运动神经元分化培养基中的脊髓神经前体细胞，并添加小分子抑制剂。

包被的板表面有助于细胞黏附。

小分子抑制剂可阻断特定的蛋白激酶，从而防止细胞凋亡。

移除用过的培养基，并加入新鲜的分化培养基。

该培养基含有一种化合物，可促进神经前体细胞向运动神经元前体分化。

此外，胶质细胞定向的前体细胞也会出现。

接着，更换为添加了DNA合成抑制剂的分化培养基。

这些抑制剂可选择性地在胶质前体细胞中诱导DNA损伤和细胞死亡，而运动神经元前体细胞则分化为成熟神经元。

用缓冲液洗涤细胞，并加入不含抑制剂的分化培养基以维持神经元。

培养过程中，需定期更换培养基以补充营养物质。

此外，更换为添加了黏附蛋白的培养基，以增强神经元的贴附，建立均一的运动神经元培养体系。

如果神经前体细胞培养物已被冷冻，请将其解冻。按照论文中所述进行培养基更换和 PBS 洗涤后，更换为含有 0.02 微摩尔阿糖胞苷的运动神经元分化培养基。

随后，在37摄氏度及5%二氧化碳条件下培养细胞48小时，直至胶质细胞定向的前体细胞作为单个增殖的扁平细胞出现，而有丝分裂后的运动神经元前体细胞则聚集成细胞簇。之后，按照文稿中所述进行培养基更换。