一种生成少突胶质细胞条件培养基的方法

0 views • 2:01 min • July 8th, 2025

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取一个涂有聚合物的培养皿。

将少突胶质细胞谱系或OL细胞加入合适的培养基中并孵育。

聚合物涂层上的正电荷吸引带负电的细胞膜,增强细胞对培养皿的附着。培养基中的生长因子和营养物质促进细胞扩增。

营养不良的培养基替换培养基并孵育。

低营养水平会在细胞中引起轻度压力,导致它们将蛋白质、脂质和其他分子(包括生长因子和细胞因子)分泌到细胞外空间。

培养基收集在管中。

过滤对培养基进行灭菌,以去除细胞碎片和不溶性成分。

含有OL细胞分泌的可溶性生物活性分子的滤液称为少突胶质细胞条件培养基或OCM。

OCM 储存在较低温度下直至进一步使用,以防止蛋白质和其他分子降解,从而保持 OCM 的有效性。

10 毫升细胞悬液铺板两个或三个预涂的 100 毫米培养皿。

37 摄氏度的加湿培养箱中在 5% 二氧化碳下孵育。

在无菌条件下的层流罩中,用10毫升温热的Mbb 27低培养基更新培养基。

5% 二氧化碳下在 37 摄氏度的加湿培养箱中孵育 2 天。

要收获OCM,请收集含有少突胶质细胞分泌因子的上清液。使用 0.22 微米过滤器对 OCM 进行过滤灭菌。

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Last updated: 27 June 2026