一种生成少突胶质细胞条件培养基的方法

取一个聚合物包被的培养皿。

将少突胶质细胞系（OL细胞）加入适宜的培养基中并进行培养。

聚合物涂层上的正电荷吸引带负电荷的细胞膜，从而增强细胞与培养皿的黏附。培养基中的生长因子和营养物质促进细胞扩增。

更换为营养贫乏的培养基并进行孵育。

低营养水平会在细胞中引发轻度应激，导致细胞向胞外空间分泌蛋白质、脂质及其他分子，包括生长因子和细胞因子。

将培养基收集到离心管中。

过滤除菌培养基以去除细胞碎片和不溶性成分。

含有少突胶质细胞分泌的可溶性生物活性分子的滤液称为少突胶质细胞条件培养基或 OCM。

将OCM储存于较低温度下以防止蛋白质和其他分子降解，从而保持OCM的有效性。

将10毫升细胞悬液接种到两至三个预先包被的100毫米培养皿中。

在37摄氏度、5%二氧化碳的湿润培养箱中孵育。

在无菌条件下，于层流罩内用 10 毫升温热的 Mbb 27 低培养基更换培养液。

在37摄氏度、5%二氧化碳的湿润培养箱中孵育2天。

收集含有少突胶质细胞分泌因子的上清液以获取条件培养基。使用0.22微米滤器对条件培养基进行过滤除菌。