从小鼠内耳分离前庭神经节神经元

取一只幼鼠头部的一半，去除脑组织。

切开颅骨顶部并切除周围组织，以暴露耳囊，即保护内耳结构的骨性外层。

将组织转移至含有缓冲培养基的培养皿中。

分离上庭和下庭神经节，其中包含前庭神经的胞体。

刮除骨嵴并采集其下方的上神经节。

将上神经节转移至含有缓冲液的新培养皿中。

去除表面的附着组织以清洁分离的神经节。

将神经节置于含有蛋白水解酶的溶液中。

这些酶会降解组织的细胞外基质，使细胞松散。

将神经节转移至含有培养基的聚合物涂层玻璃底培养皿中，并通过机械法解离组织以释放细胞。

孵育，使细胞贴壁并建立前庭神经节神经元培养。

使用闭合的手术剪挖出已处死小鼠的脑组织。切断并移除脑神经，以将脑组织完全从颅骨中分离。从头部后方开始，用镊子剥离透明的膜状物质，然后用手术剪剪开颅骨顶部并移除。

去除头颈部背面多余的组织，使解剖区域和耳囊更清洁且易于操作。将组织转移至另一含有新鲜L-15溶液的培养皿中。随后定位耳囊以及听神经、上前庭神经和下前庭神经。使用小型弹簧剪分离上、下神经节，并剪除听神经。

使用手术刀轻轻削除骨嵴，以削弱神经进入骨性囊膜下方的骨性区域。用手术刀小心清除碎屑，充分暴露神经节的整个肿胀部分。

使用精细的弹簧剪刀切断并分离向椭圆囊方向延伸的外周神经分支与神经节。用精细镊子取出上部神经节，并将其转移至含有新鲜L-15溶液的35毫米培养皿中。

将酶溶液预热后，倒入35毫米的培养皿中，置于37摄氏度的培养箱内孵育10至15分钟。使用精细镊子和小型弹簧剪仔细清理神经节，去除骨骼、多余组织、神经纤维及其他多余结构。注意尽量减少对神经节组织的损伤或去除。

将清洗后的神经节转移至预热的酶溶液中，放回培养箱孵育10至40分钟。然后将神经节转移至含有新鲜L-15溶液的35毫米培养皿中。

两到三分钟后，将神经节转移至另一个盛有滤过培养基的35毫米培养皿中。取约150微升滤过培养基加入涂覆的玻璃底培养皿中，然后将所需数量的神经节转移至盖玻片上。

从培养皿中吸取少量培养基，用培养基冲洗吹打移液管，以防止组织黏附在玻璃移液管管壁上。通过轻柔且反复地将组织经移液管吹打，直至神经节充分解离。

五分钟后，在光学显微镜下检查细胞是否已沉降到盖玻片上。小心将培养皿放入37°C培养箱中，孵育12至24小时。